Algunos parámetros técnicos del microscopio óptico.
La apertura numérica, abreviada como NA, es un parámetro técnico clave para lentes objetivos y condensadores. Sirve como un indicador importante para evaluar su desempeño, especialmente para lentes objetivos. Su valor está marcado en la carcasa exterior de la lente objetivo y el condensador respectivamente.
La apertura numérica (NA) se define como el producto del índice de refracción (n) del medio entre la lente frontal del objetivo y la muestra, y el seno de la mitad del ángulo de apertura (u). Se expresa mediante la fórmula: NA=n*sin(u/2)
El ángulo de apertura, también conocido como apertura angular, es el ángulo formado entre un punto del objeto en el eje óptico del objetivo y el diámetro efectivo de la lente frontal del objetivo. Un ángulo de apertura mayor permite que entre más luz al objetivo. Es proporcional al diámetro efectivo del objetivo e inversamente proporcional a la distancia focal.
2. Resolución
La resolución de un microscopio se refiere a la distancia mínima entre dos puntos de un objeto que el microscopio puede distinguir claramente, también llamada poder de resolución. Su fórmula de cálculo es: σ=λ / NA
donde σ es la distancia mínima resoluble; λ es la longitud de onda de la luz; NA es la apertura numérica de la lente del objetivo. Se puede observar que la resolución de un microscopio está determinada por la NA del objetivo y la longitud de onda de la luz de iluminación. Cuanto mayor sea la NA y más corta la longitud de onda de iluminación, menor será el valor de σ y mayor será la resolución.
3. Ampliación y Ampliación Útil
Dado que la lente del objetivo y el ocular logran un aumento doble, el aumento total Γ del microscopio es el producto del aumento del objetivo y el aumento del ocular Γ₁: Γ=*Γ₁
Obviamente, en comparación con una lupa, un microscopio puede lograr un aumento mucho mayor. El aumento se puede ajustar fácilmente cambiando las lentes de objetivo y los oculares con diferentes aumentos.
El aumento también es un parámetro importante del microscopio, pero un aumento mayor no siempre es mejor. El límite de aumento del microscopio se define como el aumento útil.
4. Profundidad de enfoque
Profundidad de enfoque es la abreviatura de profundidad focal. Al enfocar un objeto con un microscopio, no sólo se pueden ver claramente los puntos en el plano enfocado, sino que también se mantiene nítido un cierto rango de espesor por encima y por debajo de este plano. El espesor de esta zona clara es la profundidad de enfoque. Una profundidad de enfoque grande permite la observación de toda la capa del espécimen, mientras que una profundidad de enfoque pequeña solo permite la observación de una porción delgada del espécimen. La profundidad de enfoque tiene las siguientes relaciones con otros parámetros: (1) La profundidad de enfoque es inversamente proporcional al aumento total y la apertura numérica de la lente del objetivo. (2) Una mayor profundidad de enfoque corresponde a una resolución más baja.
Los objetivos de bajo aumento generalmente tienen una gran profundidad de enfoque, lo que dificulta la fotomicrografía. Esto se describirá en detalle en la sección sobre fotomicrografía.
