Parámetros ópticos clave de los microscopios: aumento y aumento efectivo
Dado que la imagen sufre dos aumentos sucesivos mediante la lente del objetivo y el ocular, el aumento total Γ del microscopio es el producto del aumento del objetivo y el aumento del ocular Γ₁:\\(\\boldsymbol{\\Gamma=\\beta\\Gamma_1}\\)
Obviamente, en comparación con una lupa, un microscopio puede lograr un aumento mucho mayor. El aumento total se puede ajustar cómodamente cambiando las lentes del objetivo y los oculares de diferentes potencias de aumento.
El aumento también es un parámetro importante de un microscopio, pero no es aconsejable asumir simplemente que un mayor aumento siempre es mejor. El límite superior de aumento del microscopio es el aumento efectivo.
Resolución y ampliación son dos conceptos distintos pero interrelacionados, que satisfacen la relación:\\(\\boldsymbol{500NA<\Gamma<1000NA}\)
Cuando la apertura numérica de la lente objetivo seleccionada es insuficiente, lo que significa que la resolución es inadecuada, el microscopio no puede distinguir la microestructura fina de la muestra. En este caso, una ampliación excesiva sólo produce una imagen con un contorno grande pero con detalles borrosos, lo que se conoce comoaumento vacío. Por el contrario, si la resolución cumple con el requisito pero el aumento es demasiado bajo, la imagen formada por el microscopio, aunque se puede resolver, será demasiado pequeña para que el ojo humano pueda distinguirla claramente. Por lo tanto, para aprovechar al máximo el poder de resolución de un microscopio, la apertura numérica y el aumento total deben coincidir adecuadamente.
Profundidad de enfoque
Profundidad de enfoque es la abreviatura de profundidad focal. Al enfocar un plano de objeto con un microscopio, no sólo se pueden ver claramente los puntos de ese plano, sino que también las características situadas por encima y por debajo de este plano dentro de un determinado rango de espesor permanecen nítidas. Este claro rango de espesor es la profundidad de enfoque. Una profundidad de enfoque grande permite la observación de la capa completa del espécimen, mientras que una profundidad de enfoque pequeña solo permite la observación de una porción delgada del espécimen. La profundidad de enfoque tiene las siguientes relaciones con otros parámetros técnicos: (1) La profundidad de enfoque es inversamente proporcional al aumento total y la apertura numérica de la lente del objetivo. (2) Una mayor profundidad de enfoque corresponde a una resolución más baja.
Los objetivos de bajo aumento presentan una profundidad de enfoque relativamente grande, lo que dificulta la fotomicrografía de bajo aumento. Esto se describirá en detalle en la sección sobre fotomicrografía.
