¿Qué es la microscopía de campo oscuro? ¿Qué tan pequeña se puede ver una célula?
El microscopio de campo oscuro es un tipo de microscopio óptico, también llamado ultramicroscopio. En el centro del condensador de un microscopio de campo oscuro hay una pantalla de luz para que la luz de iluminación no entre directamente en la lente humana. Sólo la luz reflejada y difractada por la muestra puede entrar en la lente del objetivo. Por tanto, el fondo del campo de visión es negro y los bordes de los objetos son brillantes. de. Este tipo de microscopio puede ver partículas tan pequeñas como de 4 a 200 nm y la resolución puede ser 50 veces mayor que la de los microscopios comunes.
principio
El microscopio de campo oscuro se modifica según la estructura del microscopio óptico ordinario utilizando el principio del efecto óptico Tyndall. Los condensadores Darkfield permiten bloquear el haz central de la fuente de luz. No es posible introducir la lente del objetivo a través de la muestra de abajo hacia arriba. Como resultado, la luz cambia su trayectoria e irradia de forma oblicua sobre la muestra observada. La muestra se refleja o se dispersa al encontrar la luz. La luz dispersada se proyecta hacia la lente del objetivo, por lo que todo el campo de visión queda oscuro.
El principio básico de la microscopía de campo oscuro es el efecto Tyndall. Cuando un haz de luz pasa a través de una habitación oscura, se puede observar un "camino" de polvo brillante en el aire desde la dirección perpendicular a la luz incidente. Este fenómeno es el efecto Tyndall. Después de reemplazar un microscopio de campo oscuro con un condensador de campo oscuro en un microscopio óptico común, debido a la oclusión de la estructura parabólica interna del condensador, la luz que irradia sobre la superficie del objeto a inspeccionar no puede ingresar directamente al objetivo. lente y ocular, y sólo puede pasar luz dispersa, reduciendo así el campo de visión. Es oscuro. Dado que el microscopio de campo oscuro no emite luz transparente al sistema de observación directa, cuando no hay ningún objeto, el campo de visión es oscuro y es imposible observar ningún objeto; cuando hay un objeto, la luz difractada por el objeto y la luz dispersada son claramente visibles en el fondo oscuro. . Al observar un objeto en un campo oscuro, la mayor parte de la luz de iluminación se refracta. Debido a la ubicación, estructura y grosor del objeto (muestra), la dispersión y refracción de la luz varían mucho.
Estructura y modificación
La estructura básica de un microscopio de campo oscuro es un conjunto óptico de microscopio ordinario más una barrera de luz. Un microscopio común se puede convertir en un microscopio de campo oscuro siempre que el condensador sea extraíble y el diámetro del soporte sea adecuado para instalar un condensador de campo oscuro. Cuando no hay un condensador de campo oscuro, puede usar papel negro grueso para hacer un escudo de luz central y colocarlo en el marco del filtro debajo del condensador de un microscopio común para obtener el efecto de campo oscuro. La pantalla de luz se utiliza para bloquear la luz en el centro de la fuente de luz, de modo que la luz sólo pueda entrar en la muestra desde el entorno. El tamaño es aproximadamente el mismo que el tamaño de apertura. Diferentes aumentos utilizan diferentes aperturas, por lo que es necesario realizar diferentes bloques de luz.
Aplicación práctica
La microscopía de campo oscuro se utiliza a menudo para observar muestras transparentes sin teñir. Debido a que estas muestras tienen un índice de refracción similar al del entorno circundante, son difíciles de ver con claridad en condiciones normales de campo brillante. Por lo tanto, se utilizan condiciones de campo oscuro para mejorar el contraste entre la propia muestra y el fondo. Este tipo de microscopio puede ver partículas tan pequeñas como entre 4 y 200 nm. Sólo puede ver la existencia, el movimiento y las características de la superficie del objeto, pero no puede distinguir la estructura fina del objeto. Clínicamente, la microscopía de campo oscuro se utiliza comúnmente para examinar espiroquetas pálidas. Se trata de una prueba de patógenos que tiene gran importancia para el diagnóstico de la sífilis temprana.
