¿Cuáles son los requisitos de muestra para microscopía óptica?
En el proceso de preparación de muestras del microscopio óptico, el espesor de la rebanada de la muestra está entre 2 y 25um; el grosor de la rebanada del microscopio electrónico está dentro de 50-100nm (a excepción del microscopio electrónico de alto voltaje, el grosor de la muestra puede alcanzar 1 um), por lo que el método de corte utilizado no es el mismo.
En cuanto al soporte, el soporte de la sección del microscopio óptico es un portaobjetos de vidrio y el soporte de la sección del microscopio electrónico es la rejilla del soporte.
En términos de fijación, las secciones del microscopio óptico se fijan con un fijador compuesto, mientras que las secciones del microscopio electrónico se fijan repetidamente con un solo fijador.
En términos de tinción, la tinción de muestras ópticas es relativamente simple. Según las diferentes muestras de observación y el tipo de microscopio óptico, suele ser suficiente utilizar algunas tinciones fijas. Existen muchos métodos para volver a teñir muestras de microscopio electrónico, y también son muy complicados, como la tinción negativa, la tinción con plata, etc.
En cuanto a la inclusión, se utilizan parafina, colodión, gelatina, etc. como agentes de inclusión para secciones de microscopio óptico; La resina epoxi, la resina de poliestireno, la resina de isobutileno y la resina soluble en agua se utilizan como agentes de inclusión para las secciones del microscopio electrónico.
Para que el campo de visión del microscopio reciba una iluminación uniforme y suficiente, es necesario ajustar el sistema de camino óptico de iluminación cuando el microscopio se instala y depura por primera vez. requisitos Además, comprender correctamente el ajuste del sistema de camino óptico de iluminación es un paso necesario después de reemplazar la bombilla en el proceso de uso del microscopio, y también es un medio necesario para probar el rendimiento del microscopio de vez en cuando en el proceso de uso diario. El ajuste del sistema de camino óptico de iluminación del microscopio incluye principalmente los siguientes 4 elementos: 1. Ajuste preliminar de la cámara de la lámpara de la fuente de iluminación fuera del microscopio ① Primero, abra la carcasa de la cámara de la lámpara y coloque la bombilla halógena en el portalámparas presionando el clip de resorte. La suciedad, como las huellas dactilares que quedan en la bombilla, afectará la vida útil de la bombilla. ②Coloque la habitación de la lámpara sobre la mesa, después de encenderla, use un destornillador especial para ajustar el orificio de la perilla de enfoque de la lámpara (marcado con "←→"), de modo que el filamento se proyecte en la pared 1-2 m de distancia, y la imagen del filamento se ajusta. Luego ajuste la altura de la lámpara para ajustar el orificio del filamento (marcado con "──") para que la posición del filamento sea la adecuada; luego ajuste los orificios de los tornillos de ajuste de posición izquierdo y derecho de la lámpara (marcados con "──") para que la posición izquierda y derecha del filamento sea la adecuada.
2. El propósito de la inspección y corrección de la posición del iluminador de la fuente de luz (filamento) en el microscopio es ajustar el extremo de la imagen del iluminador en el campo de visión de la lente del objetivo y garantizar que el campo de visión del microscopio se recibe completa y uniformemente desde la perspectiva de la fuente de luz. Iluminación, que es un requisito previo para ajustar el sistema de iluminación Kühler. Herramientas básicas requeridas: los telescopios de centrado están equipados con la compra del microscopio. ① Desconecte la funda de vidrio esmerilado en la carcasa de la lámpara y vuelva a colocar la carcasa de la lámpara en el microscopio ② Seleccione una lente de objetivo de 10×, encienda el programa de fuente de luz para encontrar la muestra y ajuste el enfoque con claridad, y luego use un objetivo de 40× lente para enfocar la muestra claramente (lente objetivo de 40x La imagen completa del filamento se puede ver claramente); ③ Abra tanto el diafragma de apertura como el diafragma de campo del condensador al máximo; ④ Desconecte uno de los oculares, reemplácelo con un telescopio de centrado, tome la parte blanca y extienda el ocular negro con la otra mano. La imagen del filamento se puede ver en el campo de visión; ⑤Si la posición del filamento no es adecuada, ajuste el orificio "──", ajuste la imagen del filamento en dirección horizontal, ajuste el orificio "──" y ajuste la imagen del filamento en dirección vertical hasta que Ajuste la imagen del filamento en forma circular. imagen que apenas llena la apertura de la lente del objetivo; ⑥ Después del ajuste, vuelva a colocar la funda de vidrio esmerilado en su posición original, desenchufe el telescopio de centrado y vuelva a colocar el ocular para el próximo ajuste. El ajuste mencionado anteriormente de la sala de lámparas de la fuente de luz de iluminación fuera del microscopio y la calibración de la posición del iluminador de la fuente de luz dentro del microscopio solo deben realizarse cuando el microscopio está instalado y depurado por primera vez y la bombilla está sustituido. En caso de confusión, puede restaurarlo al estado original de acuerdo con los pasos anteriores.
3. Ajuste correcto del sistema de iluminación Kohler (Kohler) Ajuste correcto del microscopio, una de las tareas principales es el ajuste del sistema de trayectoria de luz de iluminación, y la clave es el ajuste del sistema de iluminación Kohler. Todos los que usan microscopios, especialmente aquellos que toman micrografías, deben tener una cierta comprensión y dominio de los principios del sistema de iluminación de Kühler y sus pasos de ajuste, para que puedan aprovechar al máximo las funciones del microscopio. Las fotos resultantes pueden tener un efecto más consistente y perfecto. El principio del sistema de iluminación de Kühler es simple: la luz emitida por cualquier punto del iluminador de la fuente de luz puede iluminar el campo de visión del microscopio, y la luz emitida por cada punto del iluminador de la fuente de luz se recoge y está en el campo de visión del microscopio. Se consigue una iluminación muy suficiente y uniforme. El propósito de ajustar el sistema de iluminación Kuhler es obtener una iluminación uniforme y suficiente para el campo de visión observado, y evitar que la luz parásita afecte o interfiera con el sistema de imágenes, para evitar la formación de niebla en el negativo durante la fotografía. Componentes esenciales de un sistema de iluminación Kühler de alto ajuste: diafragma de campo, sistema de condensador con ajuste en el eje. ① Seleccione una lente de objetivo de 10× y un ocular de 10×. ② Coloque la lente frontal del condensador en la trayectoria óptica, ajuste el diafragma de apertura en una posición moderada (ni demasiado grande ni demasiado pequeña), luego levante el condensador. a la posición superior y ajuste la placa giratoria del condensador a la posición de campo brillante "J" ③ Ajuste el diafragma de campo al mínimo (0,1)
④ Coloque la muestra biológica sellada en el escenario, encienda la fuente de luz y enfoque claramente
⑤ Aparecerá un área iluminada localmente o un punto brillante en el campo de visión, que es una imagen borrosa del diafragma de campo, en la que se pueden ver claramente los detalles de la muestra; Ver los detalles de la muestra claramente
⑥ Baje ligeramente el condensador, de modo que el punto brillante en el campo de visión se estreche gradualmente y se convierta gradualmente en una imagen poligonal clara, que es la imagen clara del diafragma de campo;
⑦ En circunstancias normales, la imagen poligonal no está en el centro del campo de visión. Es necesario ajustar un par de tornillos de centrado del condensador para ajustar la imagen poligonal del campo de visión a la posición central;
⑧ Abra gradualmente el diafragma del campo de visión para que la imagen poligonal se convierta en un polígono inscrito del campo de visión y verifique aún más la condición de alineación. Si la alineación no es ideal, continúe ajustando ligeramente el tornillo de alineación;
⑨ Abra ligeramente el diafragma de campo para que la imagen poligonal desaparezca en el borde del campo de visión. En este punto, se completa el ajuste del sistema de iluminación Kühler. Después de ajustar el sistema de iluminación de Kühler, todo el campo de visión se iluminó uniformemente y las micrografías eran brillantes y claras con un contraste normal.
