Estructura y componentes principales de un microscopio de fluorescencia
(1) Fuente de luz
Hoy en día, se suele utilizar como fuente de luz una lámpara de mercurio de ultra-presión de 200 W. Está hecho de vidrio de cuarzo y tiene forma esférica en el medio, lleno de una cierta cantidad de mercurio. Durante el funcionamiento, la descarga entre dos electrodos provoca la evaporación del mercurio y la presión dentro del bulbo aumenta rápidamente. Cuando el mercurio se evapora por completo, puede alcanzar 50-70 presiones atmosféricas estándar, lo que generalmente demora entre 5 y 15 minutos. La luminiscencia de las lámparas de mercurio de ultra alta presión es el resultado de la descarga entre electrodos, que continuamente disocia y reduce las moléculas de mercurio, emitiendo fotones de luz. Emite una fuerte luz ultravioleta y azul violeta, suficiente para excitar diversas sustancias fluorescentes, por lo que se utiliza ampliamente en microscopios de fluorescencia.
(2) Sistema de filtro de color
El sistema de filtro de color es una parte importante de un microscopio de fluorescencia y consta de una placa de filtro de excitación y una placa de filtro de supresión. El modelo de placa filtrante y los nombres del fabricante a menudo no coinciden. Las placas de filtro generalmente reciben nombres de tonos de colores básicos: las letras del frente representan los tonos de color, las letras de detrás representan el vidrio y los números representan las características del modelo. microscopio olimpo
(3) Lente objetivo
Se pueden utilizar todo tipo de lentes objetivos, pero las lentes acromáticas son adecuadas para la fluorescencia debido a su extremadamente bajo rendimiento de autofluorescencia y transmisión de luz (rango de longitud de onda). Debido al hecho de que el brillo de fluorescencia de una imagen en el campo del microscopio es directamente proporcional al cuadrado de la relación de apertura de la lente objetivo e inversamente proporcional a su aumento, para mejorar el brillo de las imágenes de fluorescencia, se debe utilizar una lente objetivo con una relación de apertura mayor. Especialmente con un gran aumento, su impacto es muy significativo. Por lo tanto, para muestras con fluorescencia insuficiente, se debe utilizar una lente objetivo con una relación de apertura alta, combinada con una lente ocular lo más baja posible (4 ×, 5 ×, 6,3 ×, etc.).
(4) espejo reflectante
La capa reflectante de un espejo suele estar recubierta con aluminio porque el aluminio absorbe menos luz ultravioleta y visible en la región azul violeta, con una tasa de reflexión superior al 90%, mientras que la plata sólo refleja el 70%; Generalmente se utilizan espejos planos.
