Uso adecuado del microscopio de fluorescencia invertida
El microscopio de fluorescencia invertida es un microscopio multifuncional utilizado en el campo de la investigación en ciencias biológicas de alto nivel. Su estructura es compleja y costosa. Por lo tanto, para que los estudiantes de posgrado en medicina comprendan correctamente el funcionamiento y el uso del microscopio de fluorescencia invertida, los profesores primero deben demostrar el funcionamiento real del microscopio de fluorescencia invertida. Antes, se montó un curso para aprender los conocimientos básicos de los microscopios de fluorescencia invertida, introduciendo la estructura, el principio, la función y los métodos básicos de uso de los microscopios de fluorescencia invertida, y luego en la operación específica, para diferentes especímenes, demostrar diferentes funciones, desde poca profundidad a profundo, gradualmente Para estandarizar el uso de microscopios de fluorescencia invertida por estudiantes de posgrado en medicina.
1. Uso correcto de la observación de campo claro. Una de las funciones del microscopio de fluorescencia invertido es la observación de campo claro. El principio básico es que después de que la muestra es irradiada por la luz, la absorción de luz de cada parte es diferente para realizar imágenes en un fondo brillante. Es principalmente adecuado para células teñidas o coloreadas, Observación de muestras como secciones de tejido.
2. Uso correcto de la observación de contraste de fase. La segunda función del microscopio de fluorescencia invertido es la observación de contraste de fase. Su principio básico es convertir la diferencia de camino óptico de diferentes partes de la muestra en diferencia de amplitud. La observación se realiza a través de una lente objetivo de contraste de fase con placa de fase y una lente condensadora con diafragma anular. Es principalmente aplicable a Para la observación de células vivas o secciones de tejido no teñidas, en el proceso de enseñanza experimental, además de guiar correctamente a los estudiantes graduados de medicina para observar los métodos básicos de operación de la observación de contraste de fase, es más importante guiarlos a comprender y dominar las muestras utilizadas para la observación de contraste de fase. Para ellos, la observación microscópica de células cultivadas es la más utilizada en futuras investigaciones científicas. En primer lugar, para la selección del equipo celular, generalmente se recomienda utilizar placas de cultivo de vidrio y plástico, placas de cultivo y botellas de cultivo. La mayoría de ellos son incoloros y transparentes, y se pueden observar directamente en un microscopio fluorescente invertido sin verter el fluido celular y otros tratamientos. En segundo lugar, durante la observación microscópica, no abra la tapa del equipo a voluntad, para no contaminar las células. Finalmente, los operadores deben usar guantes, máscaras y batas blancas, que no solo pueden proteger su propia salud sino también prevenir la contaminación celular.
3. Uso correcto de la observación de fluorescencia. La tercera función del microscopio de fluorescencia invertido es la observación de fluorescencia. El principio básico es utilizar luz de excitación para excitar la muestra y generar fluorescencia, a fin de realizar la observación de la forma y la posición de la muestra. Es principalmente adecuado para la observación de muestras marcadas con fluorescencia. La observación de fluorescencia es una función importante de un microscopio de fluorescencia invertida, y sus accesorios son caros y de uso especial. Para que los estudiantes de posgrado en medicina comprendan correctamente la operación y el uso de la observación de fluorescencia, los profesores no solo deben enseñarles los métodos básicos de operación, sino, lo que es más importante, enseñarles a dominar su particularidad. En primer lugar, en la preparación de muestras, el portaobjetos y el cubreobjetos deben tener una superficie lisa y un grosor adecuado (el portaobjetos debe tener entre 0,8 mm y 1,2 mm, y el cubreobjetos debe tener alrededor de 0. {5}}.17 mm); la muestra debe tener un espesor adecuado y evitar que las células se superpongan o se enmascaren con impurezas; el medio de montaje debe usar una mezcla de igual volumen de glicerol y tampón de carbonato (0.5mol/L pH9.0-9.5). En segundo lugar, antes de la observación fluorescente, la luz eléctrica de la habitación y la luz blanca del microscopio fluorescente invertido deben apagarse para garantizar el ambiente en una habitación oscura. Finalmente, en la observación de fluorescencia, el tiempo de observación debe controlarse estrictamente, generalmente 1-2 horas/tiempo es apropiado, de lo contrario, la fluorescencia se atenuará y desaparecerá; cuando ajuste la fuente de luz, use anteojos protectores para evitar el daño de los rayos ultravioleta a los anteojos.
4. Uso correcto de la captura de imágenes. En la investigación científica, no solo se requiere que el microscopio de fluorescencia invertida pueda realizar varias observaciones, sino que también requiere que el microscopio de fluorescencia invertida pueda realizar la captura de imágenes. El sistema de microscopio de fluorescencia invertida combina un microscopio óptico con una computadora a través de la conversión fotoeléctrica, no solo para la observación microscópica en el ocular, sino también para la observación, edición y almacenamiento de imágenes dinámicas en tiempo real en la computadora.
