Principio de funcionamiento y aplicación de la microscopía electrónica de transmisión.
El microscopio electrónico de transmisión (TEM) puede observar estructuras finas de menos de {{0}}.2um que no se pueden ver claramente con un microscopio óptico. Estas estructuras se denominan estructuras submicroscópicas o ultraestructuras. Para ver estas estructuras con claridad, es necesario elegir una fuente de luz de longitud de onda más corta para mejorar la resolución del microscopio. En 1932, Ruska inventó un microscopio electrónico de transmisión utilizando un haz de electrones como fuente de luz. La longitud de onda del haz de electrones es mucho más corta que la luz visible y ultravioleta, y la longitud de onda del haz de electrones es inversamente proporcional a la raíz cuadrada del voltaje del haz de electrones emitido, lo que significa que cuanto mayor es el voltaje, más corta es la longitud de onda. En la actualidad, la resolución de TEM puede alcanzar los 0,2 nm.
El principio de funcionamiento de un microscopio electrónico de transmisión es que un haz de electrones emitido por un cañón de electrones pasa a través de un condensador a lo largo del eje óptico del cuerpo del espejo en un canal de vacío y converge en un haz de luz nítido, brillante y uniforme a través del condensador, que se irradia sobre la muestra dentro de la cámara de muestra; El haz de electrones que pasa a través de la muestra transporta la información estructural interna de la muestra. La cantidad de electrones que pasan por la parte densa de la muestra es menor, mientras que la cantidad de electrones que pasan por la parte escasa es mayor; Después del enfoque y el aumento primario a través de la lente objetivo, el haz de electrones ingresa a la lente intermedia inferior y al primer y segundo espejo de proyección para obtener imágenes con aumento completo. Finalmente, la imagen electrónica ampliada se proyecta en la pantalla fluorescente de la sala de observación; Una pantalla fluorescente convierte imágenes electrónicas en imágenes de luz visible para que los usuarios las observen. Esta sección presentará las estructuras y principios principales de cada sistema por separado.
Los usos de la microscopía electrónica de transmisión.
La microscopía electrónica de transmisión se utiliza ampliamente en ciencia de materiales y biología. Debido a la fácil dispersión o absorción de electrones por los objetos, la fuerza de penetración es baja y la densidad, el espesor y otros factores de la muestra pueden afectar la calidad final de la imagen. Por lo tanto, se deben preparar rodajas más finas y ultrafinas, generalmente de 50-100 nm. Por eso, cuando se observa con un microscopio electrónico de transmisión, la muestra debe procesarse en una capa muy fina. Los métodos comúnmente utilizados incluyen: método de corte ultrafino, método de corte ultrafino congelado, método de grabado congelado, método de fractura congelada, etc. Para muestras líquidas, generalmente se observa colgando una malla de cobre pretratada.
