Principales componentes y funciones del microscopio confocal láser.
1. Estenopeico iluminador
Función: El láser pasa a través del orificio de iluminación para formar una fuente de luz puntual. La fuente de luz puntual tiene ventajas únicas, como una fuerte direccionalidad de la fuente de luz, pequeña divergencia, alto brillo, alta coherencia espacial y temporal y excitación de polarización plana. Y formar un dispositivo confocal con el detector estenopeico y el plano focal.
2. Divisor de haz
Función: Separe la fluorescencia de excitación de la muestra de otras luces sin señal.
3.Lente objetiva
4.Plano focal
Función: La fuente de luz del punto láser ilumina el objeto y lo enfoca en el plano focal, estimulando la muestra marcada fluorescentemente para que emita fluorescencia y forme un punto focal. El punto de luz es procesado por una serie de dispositivos como la lente objetivo y el divisor de haz, y se enfoca en el orificio de iluminación y el orificio del detector, respectivamente. De aquí proviene el significado de confocal.
5. Detector de orificios
Función: Actúa como filtro espacial. Maximice la obstrucción de la luz dispersa en el plano no enfocado y la luz dispersa fuera del punto no enfocado en el plano de enfoque para garantizar que todas las señales de fluorescencia recibidas por el orificio del detector provengan de la posición de enfoque del punto de muestra, de modo que el punto enfocado por difracción en la muestra y la detección El punto de imagen estenopeico contiene la misma información (dos puntos conjugados).
6. Tubo fotomultiplicador (detector)
Función: Recibir la señal luminosa que pasa a través del orificio, convertirla en una señal eléctrica y transmitirla a la computadora, de modo que aparezca en la pantalla una imagen clara de todo el plano focal.
7. Láseres: el desarrollo de la tecnología de microscopía confocal es inseparable del rápido desarrollo de los láseres. Podemos elegir diferentes láseres según las necesidades de la investigación. Como ArUV (351.364nm), HeCd (442nm), AR (457, 488, 514nm), ArKr (488, 568, 647nm) Kr (568nm), HeNe (543nm), HeNe (633nm), etc.
8. Múltiples canales de fluorescencia: Tiene múltiples canales de fluorescencia para lograr múltiples etiquetados de muestras al mismo tiempo.
