¿Cómo elegir entre microscopio invertido y microscopio de fluorescencia?
El microscopio es un instrumento importante en el cultivo celular y experimentos derivados relacionados. En la actualidad existen varios tipos de microscopios en el mercado, y elegir un microscopio que cubra las necesidades y sea adecuado es todo un reto. A continuación, presentaremos los principios de los microscopios invertidos y los microscopios de fluorescencia para que todos puedan elegir.
El microscopio invertido, al igual que un microscopio normal, consta principalmente de tres partes: parte mecánica, parte de iluminación y parte óptica. La composición de un microscopio invertido es la misma que la de un microscopio vertical normal, excepto que la lente del objetivo y el sistema de iluminación están invertidos, con el primero debajo del escenario y el segundo encima del escenario. Esta estructura amplía significativamente la distancia efectiva entre el sistema de focos de iluminación y el escenario, lo que facilita la colocación de herramientas de observación más gruesas, como platos de cultivo y botellas de cultivo celular (por supuesto, también se pueden usar portaobjetos de vidrio), mientras que la distancia de trabajo entre los Lente objetivo y el material no necesita ser muy grande. El microscopio invertido es utilizado por instituciones médicas y de salud, universidades e institutos de investigación para observar microorganismos, células, bacterias, cultivos de tejidos, suspensiones, sedimentos, etc. Puede observar continuamente el proceso de proliferación y división de células y bacterias en un medio de cultivo, y puede capturar cualquier forma de este proceso. Ampliamente utilizado en campos como citología, parasitología, oncología, inmunología, ingeniería genética, microbiología industrial y botánica.
La microscopía de fluorescencia se utiliza para estudiar la absorción, transporte, distribución y localización de sustancias dentro de las células. Para el objeto probado, hay dos formas de generar fluorescencia: fluorescencia espontánea, que se emite directamente por irradiación ultravioleta; La fluorescencia secundaria ocurre cuando el objeto observado se trata con tintes fluorescentes y se expone a luz ultravioleta antes de emitir fluorescencia. Algunas sustancias de las células, como la clorofila, producen fluorescencia espontánea después de ser expuestas a la radiación ultravioleta; Es posible que algunas sustancias por sí mismas no emitan fluorescencia, pero si se tiñen con tintes fluorescentes o anticuerpos fluorescentes, también pueden emitir fluorescencia secundaria bajo radiación ultravioleta. Un microscopio de fluorescencia utiliza una fuente de luz puntual de alta eficiencia luminosa para emitir una determinada longitud de onda de luz (UV 365 nm o UV azul 420 nm) a través de un sistema de filtrado de color como luz de excitación, que excita las sustancias fluorescentes de la muestra para que emitan varios colores de fluorescencia. Después de eso, se observa mediante la ampliación del objetivo y el ocular. De este modo, incluso con una fluorescencia débil, es fácilmente reconocible y muy sensible en entornos de fuerte contraste. Se utiliza principalmente para estudiar la estructura, función y composición química de las células.
La microscopía de fluorescencia se puede dividir en dos tipos: tipo de transmisión y tipo de caída. El primero es más primitivo, mientras que el segundo es más avanzado. La construcción básica de los dos tipos de microscopios de fluorescencia es similar, con la principal diferencia de que la luz de excitación transmitida pasa a través de la muestra, produciendo fluorescencia en su conjunto. Luego, la fluorescencia ingresa a la lente del objetivo y cuanto mayor es el aumento, más débil es la fluorescencia; La luz de excitación que cae se proyecta sobre la superficie de la muestra, produciendo fluorescencia que ingresa a la lente del objetivo. Cuanto mayor sea el aumento, más fuerte será la fluorescencia, lo que la hace adecuada para observaciones de alta potencia. Los componentes principales de un microscopio de fluorescencia incluyen una fuente de luz de lámpara de mercurio, una placa de filtro de excitación, un espectrofotómetro (tipo gota), una placa de filtro de supresión y un condensador de campo oscuro (tipo de transmisión). Además, debido al fuerte calentamiento de las lámparas de mercurio, la mayoría de ellas también están equipadas con filtros absorbentes de calor. Algunos microscopios de fluorescencia también tienen un objetivo de contraste de fase y una apertura circular, lo que permite la observación del contraste de fase. Algunos microscopios de fluorescencia adoptan una estructura invertida, que también es un microscopio invertido, y así sucesivamente.
Además, los microscopios mencionados anteriormente se pueden ensamblar en microscopios digitales instalando CCD, que convierte las imágenes físicas vistas por el microscopio en imágenes analógicas digitales y las visualiza en una computadora. Como resultado, podemos cambiar nuestra investigación en el microcampo de la observación binocular tradicional a la reproducción a través de pantallas, mejorando así la eficiencia del trabajo.
