¿Cómo elegir entre un microscopio invertido y un microscopio de fluorescencia?
En cultivos celulares y experimentos derivados relacionados, el microscopio es un instrumento muy importante. En la actualidad, existen varios tipos de microscopios en el mercado. Es un desafío elegir un microscopio que satisfaga las necesidades y sea aplicable. La siguiente es una introducción a los principios de los microscopios invertidos y los microscopios de fluorescencia, para que pueda elegir fácilmente.
La composición del microscopio invertido es la misma que la del microscopio ordinario, e incluye principalmente tres partes: la parte mecánica, la parte de iluminación y la parte óptica. La composición del microscopio invertido es la misma que la del microscopio vertical ordinario, excepto que la lente del objetivo y el sistema de iluminación están invertidos, el primero está debajo de la platina y el segundo está encima de la platina. Tal estructura puede expandir significativamente la distancia efectiva entre el sistema de concentración de iluminación y el escenario, lo cual es conveniente para colocar objetos más gruesos para ser observados, como placas de cultivo y botellas de cultivo celular (por supuesto, también están disponibles portaobjetos de vidrio, etc.) , y al mismo tiempo, la distancia entre la lente objetivo y el material La distancia de trabajo entre ambos no tiene por qué ser muy grande. Los microscopios invertidos se utilizan para la observación de microorganismos, células, bacterias, cultivo de tejidos, suspensiones, sedimentos, etc. en unidades médicas y de salud, instituciones de educación superior e institutos de investigación. Puede observar continuamente el proceso de reproducción y división de células, bacterias, etc. en el medio de cultivo, y puede tomar fotografías de cualquier forma en el proceso. Es ampliamente utilizado en citología, parasitología, oncología, inmunología, ingeniería genética, microbiología industrial, botánica y otros campos.
La microscopía de fluorescencia se utiliza para estudiar la absorción y transporte de sustancias en las células, la distribución y localización de sustancias químicas, etc. Para el objeto bajo inspección, existen dos formas de generar fluorescencia: autofluorescencia, que emite fluorescencia directamente después de ser irradiado con luz ultravioleta luz; Algunas sustancias de las células, como la clorofila, producen autofluorescencia tras ser irradiadas con rayos ultravioleta; aunque algunas sustancias por sí mismas no pueden emitir fluorescencia, también pueden emitir una fluorescencia secundaria después de ser teñidas con tintes fluorescentes o anticuerpos fluorescentes después de ser irradiadas con rayos ultravioleta. El microscopio de fluorescencia utiliza una fuente de luz puntual con alta eficiencia luminosa para emitir luz de una cierta longitud de onda (luz ultravioleta de 365 nm o luz azul púrpura de 420 nm) a través del sistema de filtro como luz de excitación y, después de excitar las sustancias fluorescentes en la muestra para emitir fluorescencia de varios colores, luego la observación se realiza a través de la ampliación de la lente del objetivo y el ocular. De esta forma, bajo un fondo de fuerte contraste, incluso si la fluorescencia es muy débil, es fácil de identificar y tiene una alta sensibilidad. Se utiliza principalmente para la investigación de la estructura y función celular y la composición química.
Los microscopios de fluorescencia se dividen en tipo de transmisión y tipo de epi-eyección, el primero es más primitivo y el segundo es más avanzado. La estructura básica de los dos tipos de microscopios de fluorescencia es similar, la principal diferencia es: la luz de excitación del tipo de transmisión pasa a través de la muestra y toda la muestra genera fluorescencia, que luego ingresa a la lente del objetivo. Cuanto mayor sea el aumento, más débil será la fluorescencia; la luz de excitación del tipo de emisión epi se proyecta sobre la superficie de la muestra, la superficie de la muestra produce fluorescencia y la fluorescencia ingresa nuevamente a la lente del objetivo. Cuanto mayor sea el aumento, más fuerte será la fluorescencia, lo que es adecuado para la observación de gran aumento. Los componentes principales del microscopio de fluorescencia incluyen una fuente de luz de lámpara de mercurio, una placa de filtro de excitación, un espejo dicroico (tipo de episodio), una placa de filtro prensada y un condensador de campo oscuro (tipo de transmisión), etc. Además, debido a la severa generación de calor de las lámparas de mercurio, la mayoría de ellas también están equipadas con filtros absorbentes de calor. Algunos microscopios de fluorescencia también tienen objetivos de contraste de fase y diafragmas anulares, por lo que es posible realizar observaciones de contraste de fase. También existen microscopios de fluorescencia que adoptan una estructura invertida, otro microscopio invertido, etc.
Además, los microscopios mencionados anteriormente se pueden ensamblar en un microscopio digital instalando un CCD, que convierte la imagen física vista por el microscopio en una imagen en una computadora a través de la conversión de digital a analógico. Por lo tanto, podemos cambiar la investigación en el campo microscópico de la observación binocular ordinaria tradicional a la reproducción en la pantalla, mejorando así la eficiencia del trabajo.
