Cómo ajustar la intensidad del láser de un microscopio confocal de barrido láser
① Perilla de control de potencia: generalmente se establece en el 30% del valor máximo. Un mayor rendimiento acorta la vida útil del láser e introduce ruido láser. Optimice la intensidad ajustando primero AOTF, PMT y otros componentes.
② Filtro sintonizable acústico-óptico (AOTF): controla la intensidad y el haz de luz de excitación. Puede encender o apagar el láser en milisegundos o ajustar la intensidad del láser continuamente de 0 a 100%. Esto permite aplicar diferentes rayos láser y valores de intensidad seleccionados a cada píxel de la imagen.
Principio de funcionamiento: se basa en la difracción de Bragg de la luz incidente inducida por ondas acústicas que se propagan en el medio. Cuando se ingresa una señal de RF de una frecuencia específica, el AOTF difracta la luz policromática incidente y selecciona luz monocromática de longitud de onda λ. Existe una correspondencia uno a uno entre la longitud de onda de la luz monocromática seleccionada y la frecuencia de radio f. La longitud de onda de salida se puede cambiar rápida y aleatoriamente simplemente sintonizando la señal eléctrica. AOTF permite un ajuste continuo de la intensidad del láser con una respuesta rápida para estimulación local, escaneo y cambio rápido de longitud de onda en el nivel de microsegundos.
En un microscopio confocal de barrido láser, el tubo fotomultiplicador (PMT) no puede aumentar la intensidad del láser, pero ajusta la intensidad de la señal fotoeléctrica para la imagen final. Por lo tanto, ajustar el voltaje del tubo fotomultiplicador cambia el brillo de la imagen. Además, el tamaño del orificio confocal afecta el recuento de fotones y también se puede utilizar para ajustar el brillo de la imagen. El tubo fotomultiplicador es un tubo de vacío especial extremadamente sensible a la luz ultravioleta, visible e infrarroja cercana. Amplifica las señales ópticas entrantes débiles hasta 10⁸ veces para que se puedan medir las señales luminosas.
