¿Ha entendido alguna vez los principios básicos de la microscopía de contraste de fase?
El microscopio de contraste de fase fue inventado por el científico holandés Zernike en 1935 para observar muestras sin teñir. Para las células vivas y las muestras biológicas no teñidas, debido a la diferencia en el índice de refracción y el grosor de la microestructura de cada parte de la célula, cuando pasa la onda de luz, la longitud de onda y la amplitud no cambian, solo cambia la fase (diferencia de amplitud ), que es invisible al ojo humano. observar. El microscopio de contraste de fase cambia la diferencia de fase y utiliza la difracción de la luz y los fenómenos de interferencia para cambiar la diferencia de fase en una diferencia de amplitud para observar células vivas y muestras no teñidas. La diferencia entre un microscopio de contraste de fase y un microscopio ordinario es que se usa un diafragma anular en lugar de un diafragma variable, se usa una lente de objetivo con una placa de fase en lugar de una lente de objetivo ordinaria y se proporciona un telescopio para coaxialidad.
Principios básicos de la microscopía de contraste de fase:
Usando la diferencia en el índice de refracción y el grosor entre los diferentes componentes estructurales del objeto, la diferencia de la trayectoria óptica que pasa a través de las diferentes partes del objeto se convierte en la diferencia de amplitud (intensidad de la luz) y a través de la lente condensadora con un diafragma anular y la diferencia de fase con una placa de fase La lente objetivo realiza el microscopio de observación. Se utiliza principalmente para observar células vivas o secciones de tejido sin teñir y, en ocasiones, también se puede utilizar para observar muestras teñidas que carecen de contraste.
La diferencia de trayectoria óptica de la luz visible que pasa a través de la muestra se convierte en una diferencia de amplitud, lo que mejora el contraste entre varias estructuras y hace que varias estructuras sean claramente visibles. La luz se refracta después de atravesar la muestra, se desvía del camino óptico original y se retrasa 1/4λ (longitud de onda). Si aumenta o disminuye en 1/4 λ, la diferencia de la trayectoria óptica se convierte en 1/2 λ, y los dos haces interfieren después del eje de la luz. Fortalezca, aumente o disminuya la amplitud, mejore el contraste.
El microscopio de contraste de fase tiene dos funciones que otros microscopios no tienen: ① separa la luz directa (luz de fondo en el campo de visión) de la luz difractada por el objeto; ② elimina aproximadamente la mitad de la longitud de onda de la fase para que no pueda interactuar, lo que resulta en un cambio de intensidad.
