Comparación entre microscopía confocal y microscopía óptica convencional.
El microscopio es la principal herramienta para observar las células. Según las diferentes fuentes de luz, se puede dividir en dos categorías: microscopios ópticos y microscopios electrónicos. El primero utiliza luz visible (el microscopio ultravioleta utiliza luz ultravioleta) como fuente de luz, mientras que el segundo utiliza un haz de electrones como fuente de luz. Tanto los microscopios ópticos ordinarios como los microscopios confocales láser pertenecen a los microscopios ópticos.
Microscopio óptico ordinario
Un microscopio biológico común consta de tres partes, a saber: ① sistema de iluminación, que incluye fuente de luz y condensador; ② El sistema de amplificación óptica, compuesto por un objetivo y un ocular, es el cuerpo principal de un microscopio. Para eliminar la aberración esférica y cromática, tanto el ocular como el objetivo están compuestos por complejos grupos de lentes. Dispositivo mecánico, utilizado para fijar materiales y facilitar la observación.
La claridad de la imagen de un microscopio no sólo depende de su aumento, sino también de su resolución. La resolución se refiere a la capacidad de un microscopio (o un ojo humano a una distancia de 25 cm del objetivo) para distinguir objetos a pequeños intervalos. La magnitud de la resolución depende de la longitud de onda de la luz, el índice de apertura y el índice de refracción del medio. Se expresa como: R=0.61 λ/NANA=nsen /2, donde n=el índice de refracción del medio; =ángulo de apertura (el ángulo en el que la muestra abre la apertura de la lente del objetivo), NA=apertura numérica. ¿La esquina del espejo es siempre menor que 180? Por lo tanto, el valor máximo de zui para sina/2 debe ser menor que 1.
El índice de refracción del vidrio utilizado en la producción de lentes ópticas es 1,65-1.78, y cuanto más cercano sea el índice de refracción del medio utilizado al del vidrio, mejor. Para lentes de objetivo secos, el medio es aire y la relación de apertura es generalmente 0.05-0.95; La lente de aceite utiliza aceite de cedro como medio y la relación de apertura puede ser cercana a 1,5.
La longitud de onda de la luz ordinaria es {{0}} nm, por lo que el valor de resolución del microscopio no será inferior a 0.2 μ m, y la resolución del ojo humano es de 0,2 mm. Por lo tanto, el aumento máximo para el diseño de microscopios suele ser 1000X.
