¿Cuáles son las diferencias entre microscopía de fluorescencia y microscopía invertida?
El microscopio es un instrumento importante en el cultivo celular y experimentos derivados relacionados. En la actualidad existen varios tipos de microscopios en el mercado, y elegir un microscopio que cubra las necesidades y sea adecuado es todo un reto. A continuación, presentaremos los principios de los microscopios invertidos y los microscopios de fluorescencia para que todos puedan elegir.
El microscopio invertido, al igual que un microscopio normal, consta principalmente de tres partes: parte mecánica, parte de iluminación y parte óptica.
La composición de un microscopio invertido es la misma que la de un microscopio vertical normal, excepto que la lente del objetivo y el sistema de iluminación están invertidos, con el primero debajo del escenario y el segundo encima del escenario.
Esta estructura amplía significativamente la distancia efectiva entre el sistema de focos de iluminación y el escenario, lo que facilita la colocación de herramientas de observación más gruesas, como platos de cultivo y botellas de cultivo celular (por supuesto, también se pueden usar portaobjetos de vidrio), mientras que la distancia de trabajo entre los Lente objetivo y el material no necesita ser muy grande.
El microscopio invertido es utilizado por instituciones médicas y de salud, universidades e institutos de investigación para observar microorganismos, células, bacterias, cultivos de tejidos, suspensiones, sedimentos, etc. Puede observar continuamente el proceso de proliferación y división de células y bacterias en un medio de cultivo, y puede capturar cualquier forma de este proceso.
Ampliamente utilizado en campos como citología, parasitología, oncología, inmunología, ingeniería genética, microbiología industrial y botánica.
La microscopía de fluorescencia se utiliza para estudiar la absorción, transporte, distribución y localización de sustancias dentro de las células.
Para el objeto probado, hay dos formas de generar fluorescencia: fluorescencia espontánea, que se emite directamente por irradiación ultravioleta; La fluorescencia secundaria ocurre cuando el objeto observado se trata con tintes fluorescentes y se expone a luz ultravioleta antes de emitir fluorescencia.
Algunas sustancias de las células, como la clorofila, producen fluorescencia espontánea después de ser expuestas a la radiación ultravioleta; Es posible que algunas sustancias por sí mismas no emitan fluorescencia, pero si se tiñen con tintes fluorescentes o anticuerpos fluorescentes, también pueden emitir fluorescencia secundaria bajo radiación ultravioleta.
Un microscopio de fluorescencia utiliza una fuente de luz puntual de alta eficiencia luminosa para emitir una determinada longitud de onda de luz (UV 365 nm o UV azul 420 nm) a través de un sistema de filtrado de color como luz de excitación, que excita las sustancias fluorescentes de la muestra para que emitan varios colores de fluorescencia. Después de eso, se observa mediante la ampliación del objetivo y el ocular.
De este modo, incluso con una fluorescencia débil, es fácilmente reconocible y muy sensible en entornos de fuerte contraste. Se utiliza principalmente para estudiar la estructura, función y composición química de las células.
