Wprowadzenie do zalet i wad wielofotonowej mikroskopii skaningowej laserowej
Ventajas del microscopio de escaneo láser multifoton:
1. Emocionado por la luz roja o infrarroja, la dispersión de la luz es pequeña, y la dispersión de pequeñas partículas es inversamente proporcional a la cuarta potencia de la longitud de onda.
2. Los fotones más dispersos de la sección transversal de la imagen se pueden recolectar sin la necesidad de agujeros.
3. Los agujeros no pueden distinguir los fotones dispersos emitidos de áreas desenfocadas o focales, y los multifotones tienen una mejor relación señal / ruido en imágenes profundas.
4. La muestra ultravioleta o visible utilizada para la excitación de fotones individuales es fácilmente absorbida y atenuada por la muestra antes de que el haz llegue al plano focal, lo que dificulta excitar las capas profundas.
5. En términos de observación de microscopía biológica, la primera consideración es no dañar el estado activo del organismo en sí, mantener la circulación de agua, concentración de iones, oxígeno y nutrientes. En el campo de la observación de la luz, la energía térmica y fotón debe permanecer dentro de la dosis de irradiación y la energía de la luz que no dañan las células.
6. La microscopía multifoton tiene muchas ventajas. En términos de resolución tridimensional, invasión de profundidad, eficiencia de dispersión, luz de fondo, relación señal / ruido, control, etc., hay características que los microscopios láser anteriores no poseen o no pueden superar
Desventajas del microscopio de escaneo láser multifoton:
1. Solo para imágenes de fluorescencia.
2. Si la muestra incluye cromóforos que pueden absorber la luz de excitación, la muestra puede estar sometida a daño térmico.
3. La resolución se reduce ligeramente, aunque se puede mejorar mediante la utilización simultáneamente utilizando pequeños agujeros confocales, hay pérdida de señal.
4. Debido a las limitaciones de los láseres ultrarrápidos costosos, el costo de los microscopios de escaneo multifotón es relativamente alto.
