Principio de funcionamiento del microscopio confocal láser.
Principio de funcionamiento del microscopio confocal láser.
El microscopio confocal láser Olympus es un detector que puede adquirir señales. Su principio de funcionamiento es que una fuente de luz puntual se visualizará como un punto ampliado llamado "disco de Airy" después de pasar por un microscopio de fluorescencia. En un microscopio confocal interferométrico de luz blanca estándar, la luz emitida fuera del plano focal es bloqueada por un orificio cuyo tamaño determina qué parte del disco de Airy puede ingresar al detector. Cuanto más pequeño es el orificio, más nítida será la imagen resultante y más oscura será la imagen porque se pierde la mayor parte de la luz. Cuanto más pequeño sea el orificio de apertura, mejor será la resolución, pero, nuevamente, más señal de luz se perderá. El microscopio confocal láser de Olympus puede proporcionar una imagen CCD en color y una imagen confocal de escaneo láser al mismo tiempo. Los microscopios láser confocales de Olympus son capaces de medir la altura mediante una configuración confocal de una fuente de luz, una muestra y un detector. Cuando la muestra se ubica en el plano focal de la lente objetivo y la luz láser reflejada desde la superficie de la muestra se enfoca en la apertura confocal, el fotodetector recibirá la señal de la muestra. Cuando la muestra está en la posición desenfocada, la apertura confocal no recibe la señal láser, por lo que solo se recoge la señal enfocada. Esta característica puede realizar la función de corte óptico del microscopio confocal láser Olympus.
Ventajas de la microscopía láser confocal
1. Utilizando luz láser como fuente de luz, después de marcar las sondas fluorescentes correspondientes, la muestra se escanea punto por punto para obtener imágenes transversales ópticas bidimensionales capa por capa. Tiene la función de "CT celular" y puede ser respaldado por un software de reconstrucción tridimensional para obtener imágenes tridimensionales, que se pueden girar en cualquier ángulo para observar la forma tridimensional y la relación espacial de las células y los tejidos;
2. Puede observar células y tejidos vivos sin sufrir daños y medir dinámicamente la información fisiológica de las células vivas, como la concentración de iones Ca y el valor del pH en las células;
3. Puede medir la fluidez de la membrana celular, la comunicación intercelular, la fusión celular, la elasticidad del citoesqueleto, etc., y puede utilizarse como un "cuchillo ligero" para completar la "cirugía" intracelular. Esta tecnología permite la observación y medición dinámica y cuantitativa in situ de células y tejidos vivos.
