¿Qué es un microscopio de contraste de fases?
Un microscopio de contraste de fase es un microscopio que puede convertir la diferencia de fase (o diferencia de trayectoria óptica) generada cuando la luz pasa a través de un objeto en un cambio de amplitud (intensidad de la luz). Se utiliza principalmente para observar células vivas, secciones de tejido sin teñir o muestras teñidas sin contraste.
El ojo humano sólo puede distinguir cambios en la longitud de onda (color) y la amplitud de la luz visible, pero no puede distinguir cambios de fase. La mayoría de los especímenes biológicos son muy transparentes y la amplitud de las ondas de luz permanece básicamente sin cambios después de su paso, con solo cambios de fase.
El microscopio de contraste de fases básicamente convierte la diferencia de trayectoria óptica de la luz visible que pasa a través de la muestra en diferencia de amplitud, mejorando así el contraste entre varias estructuras y haciéndolas claras y visibles. La luz se refracta a través de la muestra, desviándose de la trayectoria de la luz original y retrasándose 1/4 λ (longitud de onda). Si se aumenta o disminuye aún más en 1/4 λ, entonces la diferencia de trayectoria óptica se convierte en 1/2 λ. La interferencia entre Los dos ejes fotosintéticos se fortalecen y la amplitud aumenta o disminuye, aumentando el contraste.
Desde una perspectiva estructural, la diferencia entre la microscopía de contraste de fases y la microscopía óptica ordinaria radica en:
1. Apertura anular Un diafragma con una abertura circular, instalado entre la fuente de luz y el condensador, para formar un cono hueco de luz que pasa a través del condensador y lo enfoca en la muestra.
2. Al microscopio de diferencia de fase se le ha agregado una placa de fase recubierta con fluoruro de magnesio dentro de la lente del objetivo para retrasar la fase de la luz directa o difractada en 1/4 λ. Hay dos áreas en la placa de fase, la parte por donde pasa la luz directa se llama "superficie conjugada" y la parte por donde pasa la luz difractada se llama "superficie de compensación". La placa de fase se divide en dos tipos según su efecto de trabajo:
(1) Una placa de fase positiva: retrasa la luz directa en 1/4 λ. Después de la combinación de dos conjuntos de ondas de luz, la amplitud de las ondas de luz aumenta y la estructura de la muestra se vuelve más brillante que el medio circundante, formando un contraste brillante. (también conocido como contraste negativo).
(2) Placa de fase B plus: retrasa la luz de difracción en 1/4 λ. Después de que los dos conjuntos de rayos de luz se fusionan, las ondas de luz se restan y la amplitud disminuye, lo que da como resultado una estructura de muestra más oscura que el medio circundante, formando un contraste oscuro. (también conocido como contraste positivo). Un objetivo con una placa de fase se llama objetivo de contraste de fase y la palabra "Ph" se usa a menudo en la capa exterior del objetivo.
