¿Qué hace un microscopio de fluorescencia?
Los microscopios de fluorescencia utilizados en aplicaciones de investigación funcionan sobre la base de un conjunto de filtros ópticos:
Un filtro de excitación
un divisor de haz
un filtro de emisiones
Estos filtros suelen colocarse juntos en un bloque de filtros (microscopios compuestos) o en un receptáculo plano (principalmente microscopios estereoscópicos).
El filtro de excitación seleccionará la longitud de onda para excitar un tinte particular dentro de la muestra, y el filtro de emisión actúa como control de calidad, permitiendo que pase solo la longitud de onda emitida por un fluoróforo particular. Los filtros dicroicos se utilizan para reflejar la luz en la banda de excitación y dejar pasar la luz en la banda de emisión para producir luz incidente de fluorescencia clásica.
La fluorescencia es uno de los fenómenos físicos más utilizados en microscopía biológica y analítica, principalmente por su alta sensibilidad y especificidad. La fluorescencia es una forma de luminiscencia fría.
La microscopía de fluorescencia incluso permite al usuario determinar la distribución y el número de especies moleculares individuales y su ubicación dentro de la célula. Se puede lograr el estudio de la co-regionalización y las interacciones, las concentraciones de iones, así como la observación de los procesos de citosis y citotoxicidad entre células.
Con la ayuda de la microscopía de fluorescencia de superresolución, se pueden obtener imágenes incluso de estructuras de subresolución.
