Tres tipos de observación microscópica.
I. Campo brillante BF (campo brillante BF)
La BF de campo brillante es una forma familiar de microscopía, que se usa ampliamente en patología y pruebas para observar secciones teñidas, y todos los microscopios son capaces de realizar esta función.
Campo Claro
II. Campo oscuro DF (campo oscuro DF)
El DF de campo oscuro es en realidad iluminación de campo oscuro. Se diferencia del campo brillante en que no observa directamente la luz iluminada, sino la luz reflejada o difractada del objeto que se examina. Como resultado, el campo de visión se convierte en un fondo oscuro, mientras que el objeto examinado aparece como una imagen brillante.
El principio del campo de visión oscuro se basa en el fenómeno Tyndall en óptica, el polvo en el caso de una luz intensa a través de la luz directa, el ojo humano no puede ser observado, esto se debe a la fuerte luz que lo rodea. Si se dirige luz oblicuamente hacia él, las partículas parecen aumentar de tamaño debido al reflejo de la luz y se vuelven visibles para el ojo humano.
Un accesorio especial necesario para la observación de campo oscuro es un telescopio de campo oscuro. Se caracteriza por no permitir que el haz de luz atraviese el objeto examinado de abajo hacia arriba, sino por cambiar el recorrido de la luz de manera que se dirija oblicuamente hacia el objeto examinado, de modo que la luz iluminadora no entre directamente en el lente objetivo, y se forma una imagen brillante utilizando la luz reflejada o difractada de la superficie del objeto examinado. La resolución de la observación de campo oscuro es mucho mayor que la de la observación de campo brillante, * hasta 0.02-0.004
Campo oscuro
III. Contraste de fase PH
En el desarrollo de la microscopía óptica, la exitosa invención del PH de contraste de fases es un logro importante en la tecnología de microscopía moderna. Como sabemos, el ojo humano sólo puede distinguir la longitud de onda (color) y la amplitud (brillo) de las ondas de luz, para especímenes biológicos incoloros y brillantes, cuando la luz pasa, la longitud de onda y la amplitud no cambian mucho, y es difícil para observar el espécimen en la observación de campo brillante.
El microscopio de contraste de fase utiliza la diferencia del rango de luz del objeto examinado para el examen microscópico, es decir, utiliza efectivamente el fenómeno de interferencia de la luz para cambiar la diferencia de fase indistinguible del ojo humano en una diferencia de amplitud distinguible, e incluso incolora y transparente. Las sustancias pueden volverse claramente visibles. Esto facilita enormemente la observación de células vivas, por lo que la microscopía de contraste de fases se utiliza ampliamente en microscopios invertidos.
El principio básico de la microscopía de contraste de fases es que la diferencia en el rango óptico de la luz visible transmitida a través de una muestra se convierte en una diferencia de amplitud, aumentando así el contraste entre varias estructuras y haciéndolas visibles. La luz se refracta a través de la muestra y se desvía de la trayectoria de la luz original, mientras que se retrasa 1/4λ (longitud de onda). Si se aumenta o disminuye nuevamente 1/4λ, la diferencia de rango óptico se convierte en 1/2λ, y la interferencia entre los dos haces de fotosíntesis se fortalece después de que se interfiere con los ejes de los dos haces, y la amplitud aumenta o disminuye, por lo tanto mejorando el contraste. En la estructura, el microscopio de contraste de fases tiene dos características especiales que se diferencian del microscopio óptico ordinario:
1. El diafragma anular (diafragma anular) está ubicado entre la fuente de luz y el condensador, su función es hacer que la luz atraviese el condensador para formar un cono de luz hueco, enfocándose en la muestra.
2. Placa de fase (placa de fase anular) en la lente objetivo recubierta con placa de fase de fluoruro de magnesio, la luz directa o difractada se puede retrasar en fase 1/4λ. Hay dos tipos:
1. Placa de fase: la luz directa se retrasa 1/4 λ, dos grupos de ondas de luz además de ondas de luz coaxiales, aumento de amplitud, la estructura de la muestra es más brillante que el medio circundante, la formación de contraste brillante (o contraste negativo) .
2.Placa de fase B: la luz difractada se retrasa 1/4 λ, los dos grupos de ondas de luz después de la fusión del eje de la onda de luz se reducen, la amplitud se vuelve más pequeña, se forma un contraste oscuro (o contraste positivo ), la estructura es más oscura que el medio circundante.
