Existen dos tipos de microscopios de fluorescencia con respecto a su camino óptico:
1. Microscopio de fluorescencia de transmisión: la fuente de luz de excitación pasa a través del espejo del condensador a través del material de la muestra para estimular la fluorescencia. El colector de campo oscuro de uso común, también se puede usar un colector ordinario, ajuste el reflector para que la luz de excitación se transmita y se desvíe a la muestra. Este es el tipo más antiguo de microscopio de fluorescencia. La ventaja es que la fluorescencia es fuerte con un aumento bajo y la desventaja es que la fluorescencia se debilita con el aumento del aumento. Por eso es mejor observar el material de muestra más grande.
2. Microscopio de fluorescencia de tipo descendente. Este es un nuevo tipo de microscopio de fluorescencia desarrollado recientemente, y la diferencia es que la excitación de la luz desde la lente objetivo hasta la superficie de la muestra, es decir, la misma lente objetivo que la iluminación del concentrador y la recogida de la lente objetivo de fluorescencia. La trayectoria óptica debe agregarse a un separador de haz de dos colores, que forma un ángulo de 45° con la luz de uranio, la luz de excitación se refleja en la lente del objetivo y se recoge en la muestra, la fluorescencia producida por la muestra y el objetivo. Superficie de la lente, cubierta de vidrio, reflejo de la luz de excitación en la lente objetivo al mismo tiempo, y de regreso al separador de haz de dos colores, de modo que la luz de excitación y la fluorescencia se separen de la luz de excitación residual y luego sean absorbidas por los filtros de bloqueo. Si cambia el bloque combinado de filtro de excitación diferente/separador de haz de doble color/filtro de bloqueo, puede satisfacer las necesidades de diferentes productos de reacción de fluorescencia. Las ventajas de este microscopio de fluorescencia es el campo de visión de iluminación uniforme, imágenes claras; cuanto mayor sea el aumento de la fluorescencia, más fuerte.
(B) método de microscopio de fluorescencia.
1. Abra la fuente de luz, la lámpara de mercurio de ultra alta presión para precalentar durante unos minutos para alcanzar el punto más brillante.
2. Es necesario instalar un microscopio de fluorescencia de transmisión entre la fuente de luz y el concentrador necesario para estimular el filtro, en la parte posterior del objetivo con el filtro de bloqueo correspondiente. El microscopio de fluorescencia descendente debe insertarse en la ranura del camino óptico del filtro de excitación/separador de haz bicolor/filtro de bloqueo necesario.
3. Observe con una lente de bajo aumento y ajuste el centro de la fuente de luz para que quede ubicado en el centro de todo el punto de iluminación de acuerdo con el dispositivo de ajuste de los diferentes modelos de microscopios de fluorescencia.
4. Coloque el trozo de muestra; se podrá observar el enfoque. El uso debe prestar atención a: al final de la instalación de filtros, no utilice el ojo para observar directamente, para no causar daños a los ojos; con un espejo de aceite para observar la muestra, se debe utilizar un espejo de aceite especial no fluorescente; La lámpara de mercurio de alta presión no se puede volver a abrir inmediatamente después de cerrar la lámpara; debe pasar 5 minutos antes de poder comenzar de nuevo; de lo contrario, será inestable y afectará la vida útil de la lámpara de mercurio.
(C) observación Bajo el microscopio de fluorescencia en el escenario de enseñanza con un filtro de luz azul-violeta, se pueden ver células teñidas con 0,01% de tinte fluorescente naranja amidina, y el núcleo y el citoplasma de las células se excitan para producir dos diferentes colores de fluorescencia (verde oscuro y rojo anaranjado).
