Los principales componentes y funciones del microscopio confocal láser.
1. Agujero de iluminación
Función: Haga que la luz láser pase a través del orificio de iluminación para formar una fuente de luz puntual. La fuente de luz puntual tiene ventajas únicas, como una fuerte dirección de la fuente de luz, pequeña divergencia, alto brillo, alta coherencia espacial y temporal y excitación de polarización plana. Y forma un dispositivo confocal con el orificio del detector y el plano focal.
2. Divisor de haz
Función: Separar la fluorescencia excitada por la muestra de otras luces sin señal.
3. Lente objetiva
4. Plano focal
Función: La fuente de luz del punto láser irradia el objeto y lo enfoca en el plano focal, y excita la muestra marcada fluorescentemente para que emita fluorescencia y forme un punto focal. El punto de luz es procesado por una serie de dispositivos como la lente objetivo y el divisor de haz, y se enfoca en el orificio de iluminación y el orificio del detector, respectivamente. De aquí proviene el significado de confocal.
5. Detector de orificios
Función: Desempeña el papel de filtro espacial. La luz dispersada en el plano de no enfoque y la luz dispersada fuera del punto de no enfoque en el plano de enfoque se ven obstaculizadas en la mayor medida, para garantizar que todas las señales de fluorescencia recibidas por el orificio del detector provengan de la posición de enfoque de el punto de muestra, por lo que la difracción y recolección de puntos de luz en la muestra y la detección. El punto de imagen estenopeica del detector contiene la misma información (conjugado de dos puntos).
6. Tubo fotomultiplicador (detector)
Función: Acepte la señal luminosa que pasa a través del orificio, conviértala en una señal eléctrica y transmítala a la computadora, y aparecerá una imagen clara de todo el plano focal en la pantalla.
7. Láseres: el desarrollo de la tecnología de microscopía confocal es inseparable del rápido desarrollo de los láseres. Podemos elegir diferentes láseres según las necesidades de la investigación. Como ArUV (351,364 nm), HeCd (442 nm), AR (457 488 514 nm), ArKr (488 568 647 nm) Kr (568 nm), HeNe (543 nm), HeNe (633 nm), etc.
8. Canal de fluorescencia múltiple: Tiene múltiples canales de fluorescencia para realizar múltiples etiquetados de muestras al mismo tiempo.