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La diferencia entre microscopía de dos fotones y microscopía confocal láser.

Jun 11, 2024

La diferencia entre microscopía de dos fotones y microscopía confocal láser.

 

El microscopio confocal láser es un conjunto de sistemas de observación, análisis y salida que utilizan láser como fuente de luz, principio de enfoque conjugado y dispositivo sobre la base del microscopio óptico tradicional y procesamiento de imágenes digitales del objeto observado usando una computadora. Los sistemas principales incluyen fuentes de luz láser, microscopios automáticos, módulos de escaneo (incluidos canales y orificios ópticos confocales, espejos de escaneo, detectores), procesadores de señales digitales, computadoras y dispositivos de salida de imágenes (pantallas, impresoras en color). Mediante el uso de un microscopio confocal de barrido láser, es posible realizar tomografías e imágenes de la muestra observada. Por tanto, es posible observar y analizar la estructura espacial tridimensional de las células sin sufrir daños.


Al mismo tiempo, la microscopía confocal de barrido láser también es una herramienta poderosa para la observación dinámica de células vivas, el etiquetado de inmunofluorescencia múltiple y el etiquetado de fluorescencia de iones. Analiza con precisión la esencia del espectro y distingue señales de diferentes etiquetas con espectros de emisión muy superpuestos.


Lo más importante es que para la tinción de fluorescencia multicolor, puede eliminar por completo la influencia de la diafonía de fluorescencia y, al mismo tiempo, minimizar la pérdida de la señal de fluorescencia de la muestra. Todas estas son cosas que los espejos comunes no pueden lograr.


La relación de distancia focal entre el objetivo del microscopio y el ocular.


Diferentes principios
1. Microscopio de fluorescencia: utiliza luz ultravioleta como fuente de luz para iluminar el objeto que se está probando, provocando que emita fluorescencia y luego observa la forma y posición del objeto bajo el microscopio.


2. Microscopio confocal láser: sobre la base de imágenes de microscopía de fluorescencia, se instala un dispositivo de escaneo láser para excitar sondas de fluorescencia utilizando luz ultravioleta o visible.


Diferentes características
1. Microscopio de fluorescencia: se utiliza para estudiar la absorción, transporte, distribución y localización de sustancias dentro de las células. Algunas sustancias de las células, como la clorofila, pueden emitir fluorescencia después de ser expuestas a la radiación ultravioleta; Es posible que algunas sustancias por sí mismas no emitan fluorescencia, pero si se tiñen con tintes fluorescentes o anticuerpos fluorescentes, también pueden emitir fluorescencia bajo radiación ultravioleta.


2. Microscopio confocal láser: uso de una computadora para el procesamiento de imágenes para obtener imágenes fluorescentes de la microestructura interna de células o tejidos y observar señales fisiológicas como Ca2+, valor de pH, potencial de membrana y cambios en la morfología celular. a nivel subcelular.

 

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