Técnicas de Observación por Microscopía Óptica
Un microscopio óptico es un instrumento óptico que utiliza la luz como fuente de luz para ampliar y observar estructuras diminutas que son invisibles a simple vista. El primer microscopio fue fabricado por un óptico en 1604.
En las últimas dos décadas, los científicos han descubierto que los microscopios ópticos se pueden utilizar para detectar, rastrear y obtener imágenes de objetos más pequeños que la mitad de la longitud de onda de la luz visible convencional, o unos pocos cientos de nanómetros.
Debido a que los microscopios ópticos no se han utilizado tradicionalmente para estudiar la nanoescala, a menudo carecen de una comparación calibrada con un estándar para verificar que los resultados sean correctos para obtener información precisa a esa escala. La microscopía puede indicar de manera precisa y consistente la misma ubicación de una sola molécula o nanopartícula. Al mismo tiempo, sin embargo, puede ser muy impreciso, y la posición de un objeto identificado por un microscopio con una precisión de una milmillonésima de metro puede estar realmente dentro de una millonésima de metro porque no hay error.
Los microscopios ópticos son comunes entre los instrumentos de laboratorio y pueden ampliar fácilmente diferentes muestras, desde delicadas muestras biológicas hasta dispositivos eléctricos y mecánicos. Asimismo, los microscopios ópticos son cada vez más capaces y asequibles, ya que combinan la versión científica de luces y cámaras en su teléfono inteligente.
Métodos comunes de observación de microscopía óptica
Método de observación de interferencia de interferencia diferencial (DIC)
principio
La luz polarizada se descompone en rayos mutuamente perpendiculares y de igual intensidad a través de un prisma especial, y los rayos atraviesan el objeto en dos puntos muy cercanos (menos que la resolución del microscopio), de modo que hay una ligera diferencia de fase, hacer que la imagen parezca tridimensional Sensación tridimensional.
características
Puede hacer que el objeto bajo inspección produzca un efecto estereoscópico tridimensional y el efecto de observación es más intuitivo. No se necesita una lente de objetivo especial, funciona mejor con la observación de fluorescencia y puede ajustar los cambios de color del fondo y los objetos para lograr el efecto deseado.
método de observación de campo oscuro
Darkfield es en realidad iluminación de campo oscuro. Sus características son diferentes a las del campo claro. No observa directamente la luz de la iluminación, pero observa la luz reflejada o difractada por el objeto bajo inspección. Por lo tanto, el campo de visión es un fondo oscuro, mientras que el objeto bajo inspección presenta una imagen brillante.
El principio del campo oscuro se basa en el fenómeno de Tyndall en óptica. Cuando el polvo pasa directamente por una luz intensa, el ojo humano no puede observarlo, lo que se debe a la difracción de la luz intensa. Si la luz se proyecta oblicuamente sobre ella, debido al reflejo de la luz, la partícula parece aumentar de tamaño y es visible para el ojo humano. Un accesorio especial requerido para la observación de campo oscuro es un condensador de campo oscuro. Su característica es que no permite que el haz de luz atraviese el objeto de abajo hacia arriba, sino que cambia la trayectoria de la luz para que se dispare oblicuamente hacia el objeto, de modo que la luz que ilumina no entre directamente en la lente del objetivo, y utiliza la luz de reflexión o difracción formada por la superficie del objeto Imagen brillante. La resolución de la observación de campo oscuro es mucho mayor que la de la observación de campo claro, alcanzando 0.02-0.004 μm.
