Similitudes y diferencias entre el microscopio de contraste de fases, el microscopio invertido y el microscopio óptico común

Jul 25, 2023

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Similitudes y diferencias entre el microscopio de contraste de fases, el microscopio invertido y el microscopio óptico común

 

Todos estos tipos de microscopios son microscopios ópticos, que utilizan luz visible como método de detección, que es diferente de los microscopios electrónicos, los microscopios de efecto túnel y los microscopios de fuerza atómica.
Específicamente:


Microscopio de contraste de fases, también conocido como microscopio de contraste de fases. Porque la luz producirá una ligera diferencia de fase al pasar a través de una muestra transparente, y esta diferencia de fase se puede convertir en un cambio de amplitud o contraste en la imagen, de modo que la diferencia de fase se pueda utilizar para obtener imágenes. Fue inventado por Fritz Zernike en la década de 1930 mientras estudiaba las rejillas de difracción. Por ello recibió el Premio Nobel de Física en 1953. Actualmente se utiliza ampliamente para proporcionar imágenes de contraste de especímenes transparentes, como células vivas y tejidos de órganos pequeños.


Microscopía confocal: es un método de obtención de imágenes ópticas que utiliza iluminación punto por punto y modulación espacial estenopeica para eliminar la luz dispersada del plano no focal de la muestra. En comparación con los métodos de obtención de imágenes tradicionales, puede mejorar la resolución óptica y el contraste visual. La luz de la sonda emitida desde una fuente de luz puntual se enfoca en el objeto observado a través de la lente. Si el objeto está apenas enfocado, la luz reflejada debería converger hacia la fuente de luz a través de la lente original. Este es el llamado confocal, o confocal para abreviar. Se agrega un espejo dicroico a la trayectoria óptica de la luz reflejada en el microscopio confocal para desviar la luz reflejada que ha pasado a través de la lente hacia otras direcciones. Hay un orificio (Pinhole) en su foco, y el orificio está ubicado en el foco. Detrás del deflector hay un tubo fotomultiplicador (PMT). Se puede imaginar que la luz reflejada antes y después del foco de la luz de detección pasa a través de este conjunto de sistema confocal, pero no puede enfocarse en el pequeño orificio y será bloqueada por el deflector. Luego, el fotómetro mide la intensidad de la luz reflejada en el punto focal. Su importancia es: un objeto translúcido se puede escanear en tres dimensiones moviendo el sistema de lentes. Este concepto fue propuesto por el académico estadounidense Marvin Minsky en 1953. Después de 30 años de desarrollo, el láser se utilizó como fuente de luz para desarrollar un microscopio confocal que cumplía con el ideal de Marvin Minsky.


Microscopio invertido: La composición es la misma que la de un microscopio ordinario, excepto que la lente objetivo y el sistema de iluminación están invertidos, el primero está debajo del escenario y el segundo está encima del escenario. Operación e instalación convenientes de otros equipos de adquisición de imágenes relacionados.


Un microscopio óptico es un microscopio que utiliza una lente óptica para producir un efecto de ampliación de la imagen. La luz que incide sobre un objeto se magnifica mediante al menos dos sistemas ópticos (objetivo y ocular). Primero, la lente del objetivo produce una imagen real ampliada y el ojo humano observa la imagen real ampliada a través del ocular, que actúa como una lupa. Un microscopio óptico general tiene múltiples lentes objetivo reemplazables para que el observador pueda cambiar el aumento según sea necesario. Estas lentes de objetivo generalmente se colocan sobre un disco de lente de objetivo giratorio, y los diferentes oculares pueden introducirse convenientemente en la trayectoria óptica girando el disco de lente de objetivo. Los físicos descubrieron la ley entre aumento y resolución, y la gente sabía que la resolución de los microscopios ópticos tiene un límite. Este límite de resolución limita el aumento infinito de la ampliación. 1600 veces se ha convertido en el límite máximo de aumento de los microscopios ópticos, lo que limita enormemente la aplicación de la morfología en muchos campos.
La resolución de los microscopios ópticos está limitada por la longitud de onda de la luz, que generalmente no excede 0.3 micrones. La resolución también se puede mejorar si el microscopio utiliza luz ultravioleta como fuente de luz o si el objeto se coloca en aceite. Esta plataforma se convirtió en la base para la construcción de otros sistemas de microscopía óptica.

 

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