Varias cuestiones en el uso de la microscopía de contraste de fases:
(1) Inversión de fase cuando n '
(2) El efecto de halo y atenuación gradual en el proceso de obtención de imágenes de microscopía de contraste de fase, cuando una estructura se vuelve más oscura debido al retraso de fase, no es una pérdida de luz, sino el resultado de la redistribución de la luz en el plano de la imagen. Por lo tanto, la luz que desaparece claramente en las áreas oscuras aparecerá como un halo brillante alrededor de los objetos más oscuros. Esta es una desventaja de la microscopía de contraste de fases, que dificulta la observación de estructuras finas. Cuando la apertura anular es muy estrecha, el fenómeno del halo es más severo. Otro fenómeno de la microscopía de contraste de fase es el efecto de atenuación, que se refiere a una disminución del contraste en los bordes de un área más grande con el mismo retraso de fase observado durante la observación del contraste de fase.
(3) La influencia del espesor de la muestra Al observar la diferencia, el espesor de la muestra debe ser de 5 μ mo menos. Cuando se utilizan muestras más gruesas, la capa superior de la muestra es clara, mientras que la capa más profunda será borrosa y producirá interferencia de cambio de fase e interferencia de dispersión de luz.
(4) La influencia del cubreobjetos y el portaobjetos sobre la muestra debe cubrirse con un cubreobjetos; de lo contrario, es difícil superponer el anillo brillante de la abertura anular y el anillo oscuro de la placa de fase. La observación diferencial también exige altos requisitos en cuanto a la calidad del vidrio del portaobjetos y del cubreobjetos. Cuando hay rayones, espesores desiguales o irregularidades, puede causar distorsión del anillo brillante e interferencia de fase. Además, si el portaobjetos de vidrio es demasiado grueso o demasiado delgado, hará que la abertura anular se haga más grande o más pequeña.
En la actualidad, los microscopios ópticos han evolucionado desde los microscopios biológicos tradicionales hasta varios tipos de microscopios especializados. Según sus principios de imagen, se pueden dividir en:
① Microscopio óptico geométrico: incluido el microscopio biológico, el microscopio de luz descendente, el microscopio invertido, el microscopio metalográfico, el microscopio de campo oscuro, etc.
② Microscopio óptico físico: incluye microscopio de contraste de fase, microscopio de polarización, microscopio de interferencia, microscopio de polarización de contraste de fase, microscopio de interferencia de contraste de fase, microscopio de fluorescencia de contraste de fase, etc.
③ Microscopios de conversión de información: incluidos microscopios de fluorescencia, microespectrómetros, microscopios de análisis de imágenes, microscopios acústicos, microscopios fotográficos, microscopios de televisión, etc.
Enumere varios usos de los microscopios: a Microscopio biológico: en términos generales, los microscopios se pueden dividir en microscopios estereoscópicos y microscopios biológicos. Debido a diferentes propósitos y requisitos, han surgido muchas ramas, pero los principios básicos siguen siendo los mismos. La polarización, el contraste de fases, la transmisión y la caída de luz todavía se clasifican como microscopios biológicos. El microscopio estereoscópico, también conocido como microscopio anatómico, microscopio sólido y microscopio estereoscópico, es un microscopio versátil. Es fácil de operar, tiene pocos requisitos para las muestras, tiene una larga distancia de trabajo y tiene un fuerte sentido de tridimensionalidad al observar. Se puede utilizar para observar objetos físicos o realizar algunas operaciones en muestras mientras se observa. En lugar de cortar la muestra como en un microscopio biológico, el corte requiere la tecnología y el equipo correspondientes. Por lo tanto, los microscopios estereoscópicos tienen una amplia gama de aplicaciones en campos como la microelectrónica, el montaje y mantenimiento de instrumentos de precisión y el micrograbado. Ampliamente utilizado en anatomía y microcirugía en los campos de la biología y la medicina (actualmente clasificados como microscopios quirúrgicos), la fuente de luz utilizada en biología y medicina solo puede ser una fuente de luz fría (fibra óptica); Utilizado en la industria para observación, montaje, inspección y otros trabajos de piezas pequeñas y circuitos integrados. Microscopio metalográfico: a mucha gente le gusta escribirlo como "microscopio metalográfico". El microscopio metalográfico es un microscopio que se utiliza específicamente para observar la estructura metalográfica de objetos opacos como metales y minerales. Estos objetos opacos no se pueden observar en un microscopio de transmisión normal, por lo que la principal diferencia entre ellos y un microscopio normal es que el primero utiliza luz reflejada, mientras que el segundo utiliza luz transmitida para iluminación. En un microscopio metalográfico, el haz de iluminación se dirige desde la lente del objetivo a la superficie del objeto observado, se refleja en la superficie y luego regresa a la lente del objetivo para obtener imágenes. Este método de iluminación reflectante también se utiliza ampliamente en la detección de obleas de silicio de circuitos integrados.
