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Principios de microscopía confocal y el campo.

Jan 04, 2024

Principios de microscopía confocal y el campo.

 

1, el microscopio confocal en la luz reflejada en el camino óptico más una mitad lente semirreflectante, habrá pasado a través de la lente de la luz reflejada doblada en la otra dirección, en el foco de un deflector con un orificio, el orificio es Situado en el punto focal, detrás del deflector se encuentra un tubo fotomultiplicador. Se puede imaginar que la luz reflejada antes y después del punto focal de la luz del detector a través de este conjunto de sistema confocal no podrá enfocarse en el pequeño orificio y será bloqueada por el deflector. Así, el fotómetro mide la intensidad de la luz reflejada en el punto focal.


2, principio: el microscopio óptico tradicional utiliza una fuente de luz de campo, la imagen de cada punto de la muestra se verá interferida por la difracción o dispersión de la luz de los puntos vecinos; El microscopio confocal de escaneo láser utiliza un rayo láser a través del orificio de iluminación para formar una fuente puntual de luz en la muestra en el plano focal del escaneo de cada punto de la muestra, la muestra se irradia, en la detección del orificio en la imagen. , mediante la detección del orificio después del tubo fotomultiplicador (PMT) o del dispositivo de electroacoplamiento en frío (cCCD) punto por punto o punto por punto o punto por punto, se mide la intensidad de la luz mediante un fotómetro. cCCD) recibe punto por punto o línea por línea y forma rápidamente una imagen fluorescente en la pantalla del monitor de la computadora. El orificio de iluminación y el orificio de detección están conjugados con respecto al plano focal de la lente objetivo, el punto en el plano focal se enfoca en el orificio de iluminación y el orificio de emisión al mismo tiempo, y el punto fuera del plano focal no será Se obtienen imágenes en el orificio de detección, de modo que la imagen confocal es una sección transversal óptica de la muestra, lo que supera los inconvenientes de la imagen borrosa del microscopio ordinario.


3, campos de aplicación: medicina, investigación animal y vegetal, bioquímica, bacteriología, biología celular, embriones de tejidos, ciencias de los alimentos, genética, farmacología, fisiología, óptica, patología, botánica, neurociencia, biología marina, ciencia de materiales, ciencia electrónica, mecánica, geología del petróleo, mineralogía.

 

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