Principios y características de la microscopía de campo oscuro
1. El principio y las características estructurales del microscopio de campo oscuro
La diferencia entre un microscopio de campo oscuro y un microscopio general de campo brillante se encuentra en sus diferentes concentradores. Un microscopio de campo oscuro está equipado con un concentrador sombreado centralmente, que evita que la luz pase a través del concentrador y solo permite que se proyecte oblicuamente sobre el espécimen en el portaobjetos de vidrio desde los cuatro bordes del concentrador y las áreas no blancadas. Debido a la naturaleza oblicua de la luz, no puede ingresar a la lente objetivo, lo que resulta en un campo de visión oscuro para la observación. Sin embargo, la luz emitida por el condensador en un ángulo oblicuo sobre las células bacterianas emite una luz brillante debido a la dispersión de la luz, que se refleja nuevamente en la lente objetivo. Como resultado, la imagen del objeto brillante en el campo de visión oscuro se puede ver en el microscopio.
2. Método de operación
① Use un microscopio de campo oscuro de investigación o retire el condensador de un microscopio óptico regular y reemplácelo con un condensador de campo oscuro.
② Ya sea que use una lente objetivo seca o una lente objetivo inmerso en aceite, se debe agregar una gran gota de alquitrán a la lente superior del condensador durante la inspección del espejo.
③ Coloque la muestra de gotas colgantes preparadas en el escenario y levante el condensador hacia la parte superior para permitir que el aceite entre en contacto con el portaobjetos.
④ Amplifique la fuente de luz.
⑤ Ajuste y enfoque el eje óptico del condensador. Use una lente de objetivo de 10 * para encontrar la imagen del objeto que se inspecciona. Baje la abertura del iris del condensador hasta que se pueda ver el contorno del campo de la apertura de visión en el campo de visión. Luego, ajuste lentamente el condensador hacia arriba y hacia abajo para que la imagen del campo de visión sea más clara. Si la apertura del campo de vista no está en el centro, use los dos botones de ajuste en el exterior del condensador para ajustarlo. Cuando el punto de luz brillante esté en el centro del campo de visión, téngelo nuevamente para observar.
3. Precauciones
① La abertura numérica de la lente objetivo utilizada para la observación del campo oscuro debe ser alrededor de 1. 00-1. 25. Si es demasiado alto, el efecto puede no ser bueno. Es mejor usar una lente objetivo con una parada de campo y rotar el anillo de ajuste en el medio del espejo animal para cambiar libremente el tamaño de la abertura numérica.
② Los portaobjetos de vidrio requeridos y los resbalones de cubierta deben estar libres de arañazos y libres de polvo, y la lente delantera de la lente objetivo también debe estar limpia y libre de polvo. El grosor de los portaobjetos y los portaobjetos de la cubierta debe cumplir con el estándar. El portaobjetos de vidrio es demasiado grueso, y el enfoque del condensador caerá dentro del portaobjetos, incapaz de alcanzar el plano del objeto que se está probando; Al usar una lente de aceite, debido a la corta distancia de trabajo de la lente objetivo, incluso es imposible enfocarse, lo que resulta en la incapacidad de ver o ver claramente el objeto que se inspecciona.
③ Durante la inspección del espejo, la habitación debe estar oscura. Si tales condiciones no están disponibles, los dispositivos de sombreado deben usarse tanto como sea posible para evitar que la luz ingrese alrededor del ocular.
