Métodos de preparación de muestras de microscopía óptica y electrónica.
Los métodos de preparación microscópica generalmente incluyen cuatro categorías: método de corte, método de montaje completo, método de frotis y método de tableta.
①Método de corte. El espesor de corte de un microscopio óptico está entre 2 y 25 micras. Generalmente, es apropiado un espesor de corte de aproximadamente 10 micrómetros para materiales animales y vegetales. Los métodos de corte varían según el medio de inclusión. Los más utilizados son el método de corte con parafina, el método de corte con coloide de algodón, el método de corte congelado y el método de metacrilato de etilenglicol (denominado método GMA). El método de corte en parafina incluye pasos tales como fijación, inclusión, corte, tinción, deshidratación y montaje. La clave es incrustar el material biológico en parafina, utilizar parafina como soporte y cortar el material biológico sumergido en el bloque de cera en rodajas finas ideales. El proceso de operación es: fijación → lavado con agua → deshidratación de alcohol paso a paso de baja concentración a alta concentración → transparencia de xileno → inmersión en cera → incrustación → seccionamiento → parche → desparafinado de xileno → tratamiento de alcohol paso a paso de alta concentración a baja concentración. Finalmente, pasa a agua → teñido → deshidratación gradual de alcohol de baja concentración a alta concentración → transparencia de xileno → sellado con pegamento de resina. Los pasos básicos son los mismos en todas las técnicas de producción.
②Método de sellado integral. Método de preparación de montaje completo para células individuales, organismos diminutos u órganos dispersos. Este método también requiere varios pasos de fijación, tinción, deshidratación, transparencia y montaje. Este método se utiliza para preparar paramecios y piezas bucales de insectos.
③Método de frotis. Un método de preparación en el que muestras biológicas fácilmente dispersables se extienden sobre un portaobjetos de vidrio. Un frotis de sangre es un ejemplo.
④Método de prensado de tableta. Coloque tejidos naturales y fácilmente dispersables o tejidos que se dispersan fácilmente después del procesamiento, como espermatocitos animales y células de la punta de la raíz, en un portaobjetos de vidrio, agregue un cubreobjetos y triture el tejido con fuerza para formar las células o células del interior. La estructura es extendido en una capa del método de producción. El método de prensado se utiliza a menudo para observar los cromosomas, generalmente teñidos con acetato magenta, rojo liquen y fucsina carbólica.
