Preexamen y ajuste de microscopía de fluorescencia:
(1) Antes de cada observación de fluorescencia, es necesario comprobar de forma rutinaria la alineación del filamento, el enfoque de la trayectoria óptica, la apertura de apertura y los ajustes de apertura del campo de visión del dispositivo de fluorescencia.
(2) Si los componentes del filtro de excitación/emisión de fluorescencia requeridos están instalados en el convertidor, si el objetivo del microscopio de fluorescencia está configurado correctamente y si se eliminan las manchas de aceite y el polvo frente a la lente del objetivo.
(3) De manera similar, al observar la diferencia en la luz transmitida, es necesario verificar la conjugación de la lente de enfoque con el centro y el anillo de contraste con la lente objetivo.
(4) Compruebe si hay líquido o polvo colgando del portamuestras (portaobjetos de vidrio, cubreobjetos y otros recipientes) y si el espesor está dentro del rango de distancia de trabajo calibrado por la lente del objetivo. Las muestras cortadas no deben ser demasiado gruesas; se recomienda aproximadamente menos o igual a 10 μm.
(5) Debido a la presencia de rayos ultravioleta en la fuente de iluminación, se debe colocar una sombrilla marrón sobre la plataforma de carga para evitar daños por rayos UV a la retina.
(6) El voltaje inestable puede reducir la vida útil de las lámparas de mercurio de alto voltaje y se debe agregar un regulador de voltaje a la fuente de alimentación de la fuente de luz.
(7) Para prolongar la vida útil de la lámpara de mercurio, sólo se puede apagar 15 minutos después de encenderla; Una vez que se apaga el suministro de energía fluorescente de la lámpara de mercurio, es necesario esperar al menos 10 minutos para enfriar el vapor de mercurio a su estado original cuando se reinicia; de lo contrario, afectará la vida útil de la lámpara.
Observación de imágenes de microscopio de fluorescencia:
(1) Después de encender la fuente de la lámpara fluorescente durante aproximadamente 5-10 minutos, la intensidad de excitación tiende a estabilizarse y la muestra se carga para su observación; Para evitar que la excitación excesiva de la luz durante el enfoque y la búsqueda de imágenes provoque la extinción de la fluorescencia de la muestra, primero se reduce la apertura del microscopio de fluorescencia o se agrega un filtro ND para ajustar la excitación a una intensidad moderada y se mueve la platina de la muestra. regularmente. Después de determinar la imagen especular, se ajusta al estado de fluorescencia para la grabación.
(2) Ajustes con mala calidad de imagen. Las medidas de ajuste necesarias que se pueden tomar, excluyendo los factores de preparación de la muestra, son:
① Excluya los dispositivos de sombreado o limitación en la ruta óptica de imágenes, como accesorios DIC, filtros ND, etc.
② Reajuste la apertura de enfoque y apertura del colector del microscopio de fluorescencia.
③ Ajuste con cuidado el anillo de corrección de cobertura del objetivo del microscopio de fluorescencia.
