Métodos de preparación de muestras para microscopía óptica y electrónica de películas.
El método de microfilmación generalmente incluye cuatro categorías: método de seccionamiento, método de sellado general, método de recubrimiento y método de prensado.
①Método de corte. El espesor del corte del microscopio óptico es de entre 2 y 25 micrones, para materiales vegetales y animales en general, el espesor del corte es de aproximadamente 10 micrones. El método de corte varía según los diferentes agentes de inclusión. Los más utilizados son el método de corte con parafina, el método de corte con pegamento de algodón, el método de corte congelado y el método de metacrilato de glicol (denominado método GMA). El método de corte en parafina incluye los pasos de fijación, inclusión, corte, tinción, deshidratación y sellado. La clave es incrustar el biomaterial en cera de parafina y utilizar cera de parafina como soporte para cortar el biomaterial sumergido en el bloque de cera en rodajas finas ideales. El proceso de operación es el siguiente: fijación → lavado con agua → paso a paso de baja a alta concentración deshidratación de alcohol → transparencia de xileno → inmersión en cera → inclusión → seccionamiento → parchado → desparafinado de xileno → paso a paso de alta a baja concentración tratamiento con alcohol y finalmente transición a agua → tinción → paso a paso de deshidratación de alcohol de baja a alta concentración → transparencia de xileno → sellado con adhesivo de resina. Los pasos básicos involucrados son los mismos en todo tipo de técnicas cinematográficas.
② Método de sellado integral. Se utiliza para células individuales, organismos diminutos u órganos dispersos del método de película montada completa. Este método también requiere varios pasos de fijación, tinción, deshidratación, transparencia y sellado. Este método se utiliza para la preparación del aparato bucal de crisopas e insectos.
Método de frotis. Un método de preparación en el que se recubre un portaobjetos con una muestra biológica fácilmente dispersable. Un ejemplo es el frotis de sangre.
④Método de prensado. Los tejidos naturales que se dispersan fácilmente o los tejidos que se dispersan fácilmente después del tratamiento, como espermatocitos animales, células de la punta de la raíz, etc., se colocan en el portaobjetos, además de un cubreobjetos, y luego se aplastan con fuerza los tejidos, de modo que las células o estructuras intracelulares se extiendan en una capa. de los métodos de filmación. El método de prensa se utiliza a menudo para observar los cromosomas, generalmente teñidos con acetato magenta, rojo liquen y rojo ácido carbólico.
