Método para hacer portaobjetos para microscopio.
Hay tres métodos para hacer portaobjetos para microscopio:
1. Método de frotis
El método de frotis es un método de preparación en el que el material se extiende uniformemente sobre el portaobjetos.
Los materiales de frotis incluyen organismos unicelulares, pequeñas algas, sangre, cultivos bacterianos, tejidos sueltos de plantas y animales, nidos de esperma, anteras, etc.
Se debe prestar atención al untar:
(1) El portaobjetos debe estar limpio.
(2) La diapositiva debe mantenerse plana.
3) El recubrimiento debe ser uniforme. Aplicar la gota de líquido de recubrimiento a la derecha del centro del portaobjetos y extenderla bien con la hoja de un bisturí o un palillo, etc.
4) La capa debe ser fina. Utilice otro portaobjetos como empujador, empuje suavemente de derecha a izquierda a lo largo de la superficie del portaobjetos con la gota de solución de aplicación (el ángulo entre los dos portaobjetos debe ser de 30 grados a 45 grados) y aplique una capa uniformemente delgada.
5) Fijación. Si es necesaria una fijación, utilice un fijador químico o una fijación por desecación (bacteriana).
6) Tinción. Utilice azul de metileno para las bacterias y la tinción de Rachel para la sangre. La solución colorante debe cubrir toda la superficie recubierta.
7) Enjuague. Absorber sobre papel absorbente o secar al horno.
8) Sellar la película. Para almacenamiento a largo plazo, utilice una película para árboles canadiense.
2. Método de prensado de película
El método de película de presión consiste en colocar material biológico entre el portaobjetos y la cubierta, aplicando una cierta presión, las células del tejido se separarán mediante un método de preparación.
(1) tomar material. Observación de la división celular, la división celular debe seleccionarse como materiales células de tejido frescas y exuberantes. Como puntas de raíces, tejido meristemático de la punta del tallo, células de la médula ósea, anteras (células madre del polen). Nido de espermatozoides (espermatogonias), etc.
(2) Fijación. La fijación del material se puede determinar según las necesidades, inmediatamente después de tomar la observación de la película de presión del material, no se puede realizar un tratamiento fijo por separado (y la tinción sincrónica); Si no toma el material inmediatamente después de la inspección, el material se puede fijar con un fijador (generalmente con fijador de acetato de alcohol). Fijado de 2 a 24 horas (dependiendo del material) después del lavado con etanol al 95%, conservado en etanol al 70%, en espera.
(3) Disociación. Las células no son fáciles de dispersar el material con un tratamiento con solución de separación por hidrólisis (como HCl 1 N o ácido clorhídrico y una solución de alcohol), tratamiento general de 6 a 20 minutos, después de la disociación y enjuague con agua antes de teñir.
(4) Tinción. Hay muchos tipos de manchas. La observación de los cromosomas se utiliza comúnmente para teñir con una solución de tinción de acetato magenta.
(5) Prensado de película. Coloque el material en un portaobjetos, agregue una gota de agua o solución colorante, cubra el cubreobjetos y presione suavemente el portaobjetos con el pulgar.
(6) Observación. Después de presionar la película, se puede observar bajo el microscopio.