La microscopía confocal láser utiliza luz láser como fuente de luz.
El microscopio óptico tradicional utiliza una fuente de luz de campo y la imagen de cada punto de la muestra se verá interferida por la difracción o la luz dispersa de puntos adyacentes; El microscopio confocal láser utiliza el rayo láser para formar una fuente de luz puntual a través del orificio de iluminación para escanear cada punto del plano focal de la muestra, y se toma una imagen del punto irradiado en la muestra en el orificio de detección, que se recibe punto por punto. o línea por punto o línea por el tubo multiplicador de puntos (PMT) o el dispositivo acoplado en frío (cCCD) detrás del orificio de detección, y forma rápidamente una imagen fluorescente en la pantalla del monitor de la computadora. El orificio de iluminación y el orificio de detección están conjugados con respecto al plano focal de la lente objetivo. Los puntos en el plano focal se enfocan al mismo tiempo en el orificio iluminador y en el orificio emisor. Los puntos fuera del plano focal no se visualizarán en el orificio de detección. La imagen confocal obtenida de esta manera es la sección transversal óptica de la muestra, lo que supera las deficiencias del desenfoque de la imagen de un microscopio común.
El microscopio confocal láser es un conjunto de sistemas de observación, análisis y salida que utiliza láser como fuente de luz, adopta un principio de enfoque conjugado y un dispositivo basado en el microscopio óptico tradicional y utiliza una computadora para procesar la imagen digital del objeto observado. La resolución de las imágenes ópticas aumenta entre un 30 y un 40 por ciento, y se utiliza luz ultravioleta o visible para excitar sondas fluorescentes para obtener imágenes fluorescentes de estructuras finas dentro de células o tejidos, y para observar señales fisiológicas y cambios en la morfología celular en el nivel subcelular. nivel, convirtiéndose en una nueva generación de herramientas de investigación en los campos de la morfología, la biología molecular, la neurociencia, la farmacología, la genética, etc.
