Introducción a las ventajas y desventajas del microscopio de barrido láser multifotónico
Ventajas de la microscopía de barrido láser multifotónica:
1. Excitada por luz roja o luz infrarroja, la dispersión de la luz es pequeña y la dispersión de partículas pequeñas es inversamente proporcional a la cuarta potencia de la longitud de onda.
2. Se pueden recolectar más fotones dispersos de la sección de imágenes sin poros.
3. El orificio no puede distinguir los fotones dispersos emitidos desde el área desenfocada o el área de enfoque, y la relación señal-ruido de las imágenes de fotones múltiples en capas profundas es buena.
4. La luz ultravioleta o visible utilizada para la excitación de un solo fotón es fácilmente absorbida y atenuada por la muestra antes de que el haz alcance el plano focal, y no es fácil excitar capas profundas.
5. En términos de observación con microscopio biológico, la primera consideración es no dañar el estado activo del propio organismo y mantener la circulación de agua, concentración de iones, oxígeno y nutrientes. En el caso de la observación de la luz, tanto el calor como la energía de los fotones deben permanecer dentro de la cantidad de irradiación y la energía luminosa que no dañe las células.
6. La microscopía multifotónica tiene muchas ventajas. Como resolución tridimensional, penetración profunda, eficiencia de dispersión, luz de fondo, relación señal-ruido, control, etc., todos tienen características que los microscopios láser anteriores no tenían o no podían superar.
Desventajas de la microscopía de barrido láser multifotónica:
1. Sólo para imágenes de fluorescencia.
2. Si la muestra incluye cromóforos que absorben la luz de excitación, la muestra puede sufrir daños térmicos.
3. La resolución se reduce ligeramente. Aunque se puede mejorar utilizando al mismo tiempo la apertura confocal, la señal se pierde.
4. Debido a la limitación de los costosos láseres ultrarrápidos, el costo del microscopio de barrido multifotónico es relativamente alto.
