Introducción a las ventajas y desventajas de los microscopios de barrido láser multifotónicos
Ventajas del microscopio de barrido láser multifotónico:
1. Excitada por luz roja o infrarroja, la dispersión de la luz es pequeña y la dispersión de partículas pequeñas es inversamente proporcional a la cuarta potencia de la longitud de onda.
2. Se pueden recolectar más fotones dispersos de la sección transversal-de imágenes sin necesidad de perforaciones.
3. Los poros no pueden distinguir los fotones dispersos emitidos desde áreas focales o desenfocadas, y los multifotones tienen una mejor relación señal-a-ruido en imágenes profundas.
4. La luz ultravioleta o visible utilizada para la excitación de un solo fotón es fácilmente absorbida y atenuada por la muestra antes de que el haz alcance el plano focal, lo que dificulta la excitación de capas profundas.
5. En términos de observación con microscopía biológica, la primera consideración es no dañar el estado activo del propio organismo, mantener la circulación de agua, concentración de iones, oxígeno y nutrientes. En el campo de la observación de la luz, tanto la energía térmica como la fotónica deben permanecer dentro de la dosis de irradiación y la energía luminosa que no dañe las células.
6. La microscopía multifotónica tiene muchas ventajas. En términos de resolución tridimensional-, invasión de profundidad, eficiencia de dispersión, luz de fondo, relación señal-a-ruido, control, etc., hay características que los microscopios láser anteriores no poseen o no pueden superar.
Desventajas del microscopio de barrido láser multifotónico:
1. Sólo para imágenes de fluorescencia.
2. Si la muestra incluye cromóforos que pueden absorber la luz de excitación, la muestra puede estar sujeta a daños térmicos.
3. La resolución se reduce ligeramente, aunque se puede mejorar utilizando simultáneamente pequeños agujeros confocales, hay pérdida de señal.
4. Debido a las limitaciones de los costosos láseres ultrarrápidos, el costo de los microscopios de barrido multifotónicos es relativamente alto.
