Consejos y trucos sobre el microscopio de fluorescencia
(i) Diapositivas
El espesor del portaobjetos debe estar entre 0.8 y 1,2 mm; pendientes demasiado gruesas, por un lado, absorben más luz, por otro lado, no pueden provocar la excitación de la luz en la muestra recogida. El portaobjetos debe ser liso, de espesor uniforme y sin autofluorescencia evidente. A veces se requieren portaobjetos de vidrio de cuarzo.
(ii) Cubreobjetos
Grosor del cubreobjetos de aproximadamente 0.17 mm, limpio. Para mejorar la excitación de la luz, también se puede utilizar interferir con el cubreobjetos, que es una superficie especial recubierta con varias capas de diferentes longitudes de onda de luz que desempeñan un papel diferente en la interferencia de sustancias (como el fluoruro de magnesio) de el cubreobjetos, que puede generar fluorescencia a través de la excitación suave y reflectante de la luz, la excitación reflejada de la luz puede ser la excitación de la mujer muestra.
(iii) especímenes
Las secciones de tejido u otras muestras no pueden ser demasiado gruesas, ya que la luz de excitación demasiado espesa se consume principalmente en la parte inferior de la muestra y la lente del objetivo se observa directamente en la parte superior de la excitación insuficiente. Además, la superposición de células o el enmascaramiento de impurezas afectan el juicio.
(D) agente sellador
El agente sellador comúnmente usado, glicerol, debe estar libre de autofluorescencia, incoloro y transparente, el brillo de la fluorescencia en pH 8,5 ~ 9,5 es más brillante, no es fácil que se desvanezca rápidamente. Por lo tanto, se usa comúnmente glicerina y 0.5mol/lpH9.0 ~ 9,5 de tampón de carbonato una cantidad igual de mezcla como agente sellador.
(E) aceite de espejo
Microscopio de fluorescencia de campo oscuro general y observación de muestras de espejo de aceite, se debe usar aceite de espejo, preferiblemente usando aceite de espejo especial no fluorescente, también se puede usar en lugar del glicerol mencionado anteriormente, también se puede usar parafina líquida, pero el índice de refracción de la inferior, afectando levemente la calidad de la imagen.
