Cinco modos de observación del microscopio.
1. Campo claro BF
La microscopía de campo brillante es un método de examen microscópico familiar, que se usa ampliamente en patología, inspección y observación de secciones teñidas. Todos los microscopios pueden realizar esta función.
2. Observación de campo oscuro
Darkfield es en realidad iluminación de campo oscuro. Sus características son diferentes a las del campo claro. No observa directamente la luz de la iluminación, pero observa la luz reflejada o difractada por el objeto bajo inspección. Por lo tanto, el campo de visión se convierte en un fondo oscuro, mientras que el objeto bajo inspección presenta una imagen brillante.
El principio del campo oscuro se basa en el fenómeno de Tyndall en óptica. Cuando el polvo pasa directamente por una luz intensa, el ojo humano no puede observarlo, lo que se debe a la difracción de la luz intensa. Si la luz se proyecta oblicuamente sobre ella, debido al reflejo de la luz, la partícula parece aumentar de tamaño y es visible para el ojo humano.
Un accesorio especial requerido para la observación de campo oscuro es un condensador de campo oscuro. Su característica es que no permite que el haz de luz atraviese el objeto de abajo hacia arriba, sino que cambia la trayectoria de la luz para que se dispare oblicuamente hacia el objeto para evitar que la luz que ilumina entre directamente en la lente del objetivo. imagen brillante. La resolución de la observación de campo oscuro es mucho mayor que la de la observación de campo claro, hasta {{0}}.02—0.004
3. Microscopía de contraste de fase
Durante el desarrollo de los microscopios ópticos, la invención exitosa de la microscopía de contraste de fase es un logro importante en la tecnología microscópica moderna. Sabemos que el ojo humano solo puede distinguir la longitud de onda (color) y la amplitud (brillo) de las ondas de luz. Para especímenes biológicos incoloros y transparentes, cuando pasa la luz, la longitud de onda y la amplitud cambian poco, y es difícil observar el espécimen en la observación de campo claro. .
El microscopio de contraste de fase utiliza la diferencia en la trayectoria óptica del objeto a inspeccionar, es decir, utiliza eficazmente el fenómeno de interferencia de la luz para cambiar la diferencia de fase que el ojo humano no puede resolver en una diferencia de amplitud resoluble, incluso para incoloros. y sustancias transparentes. hacerse claramente visible. Esto facilita enormemente la observación de células vivas, por lo que la microscopía de contraste de fase es muy utilizada en microscopios invertidos.
El principio básico del microscopio de contraste de fase es cambiar la diferencia de trayectoria óptica de la luz visible que pasa a través de la muestra en una diferencia de amplitud, mejorando así el contraste entre varias estructuras y haciendo que varias estructuras sean claramente visibles. La luz se refracta después de atravesar la muestra, se desvía del camino óptico original y se retrasa 1/4λ (longitud de onda) al mismo tiempo. Si aumenta o disminuye en 1/4 λ, la diferencia de la trayectoria óptica se convierte en 1/2 λ, y los dos haces interfieren después de que el eje óptico fortalece, aumenta o disminuye la amplitud, mejora el contraste. En términos de estructura, los microscopios de contraste de fase tienen dos características especiales diferentes de los microscopios ópticos ordinarios:
1. El diafragma anular (diafragma anular) está ubicado entre la fuente de luz y el condensador, y su función es hacer que la luz que pasa a través del condensador forme un cono de luz hueco y lo enfoque en la muestra.
2. Placa de fase (placa de fase anular) Se agrega una placa de fase recubierta con fluoruro de magnesio a la lente del objetivo, que puede retrasar la fase de luz directa o luz difractada en 1/4λ. Dividido en dos tipos:
1. Placa de fase A: retrasa la luz directa en 1/4λ, agrega las ondas de luz después de la combinación de dos conjuntos de ondas de luz y aumenta la amplitud. La estructura de la muestra se vuelve más brillante que el medio circundante, formando un contraste brillante (o contraste negativo).
2. Placa de fase B: retrasa la luz difractada en 1/4λ, después de alinear los dos grupos de luz, las ondas de luz se restan y la amplitud se vuelve más pequeña, formando un contraste oscuro (o contraste positivo), y la estructura es más oscuro que el medio circundante.
4. Microscopía de interferometría diferencial
La microscopía de interferencia diferencial apareció en la década de 1960. No solo puede observar objetos incoloros y transparentes, sino que también muestra una sensación de relieve tridimensional y tiene algunas ventajas que la microscopía de contraste de fase no puede lograr. El efecto de observación es aún mejor. natural.
principio;
La interferencia diferencial llamada microscopía es el uso de un prisma Wollaston especial para dividir el haz de luz. Las direcciones de vibración de los haces divididos son perpendiculares entre sí y la intensidad es igual, y los haces atraviesan el objeto en dos puntos que están muy cerca uno del otro, y hay una ligera diferencia de fase. Dado que la distancia dividida entre los dos haces de luz es extremadamente pequeña, no existe un fenómeno de doble imagen, por lo que la imagen presenta una sensación tridimensional tridimensional.
5. Microscopio polarizador
El microscopio polarizador es un tipo de microscopio para identificar las propiedades ópticas de la estructura fina de la materia. Todas las sustancias con birrefringencia se pueden distinguir claramente bajo un microscopio polarizador. Por supuesto, estas sustancias también se pueden observar con el cabello teñido, pero algunas no son posibles y se debe usar un microscopio polarizador.
La característica del microscopio polarizador es el método de cambiar la luz ordinaria a luz polarizada para la inspección del microscopio para identificar si una determinada sustancia es de refracción simple (isotrópica) o birrefringencia (anisotropía).
La birrefringencia es una propiedad fundamental de los cristales. Por lo tanto, los microscopios de polarización se usan ampliamente en minerales, químicos y otros campos. También tiene aplicaciones en biología y botánica.
