Método de conteo directo de microorganismos utilizando un microscopio.
El uso de un hemocitómetro para contar directamente los microorganismos bajo un microscopio es un método comúnmente utilizado para el recuento microbiano. La ventaja de este método es su intuición y rapidez. Coloque la suspensión bacteriana adecuadamente diluida (o suspensión de esporas) en la cámara de conteo entre el portaobjetos del hemocitómetro y el cubreobjetos, y cuente bajo un microscopio. Debido al volumen constante de la sala de recuento (0,1 mm2), el número total de microorganismos por unidad de volumen se puede convertir en función del número de microorganismos observados bajo el microscopio. Debido a que este método calcula la suma de células bacterianas vivas y muertas, también se le conoce como método de recuento bacteriano total.
Una placa de recuento de células sanguíneas suele ser un portaobjetos de vidrio especialmente diseñado con cuatro ranuras que forman tres plataformas. La plataforma central está dividida por la mitad mediante una corta ranura horizontal y cada lado de la plataforma está grabado con una rejilla. Cada cuadrícula está dividida en nueve cuadrados grandes, y el cuadrado grande del medio es la sala de recuento, donde se lleva a cabo el recuento microbiano. La estructura de la placa de recuento de células sanguíneas se muestra en la Figura VIII-1.
Generalmente existen dos especificaciones para la escala de la sala de recuento. Una es que un cuadrado grande se divide en 16 cuadrados medianos, y cada cuadrado mediano se divide a su vez en 25 cuadrados pequeños (Figura VIII -2); Otro método consiste en dividir un cuadrado grande en 25 cuadrados medianos, y cada cuadrado mediano se divide en 16 cuadrados pequeños (Figura VIII -1, C). Pero independientemente del tamaño del tablero de conteo, el número de cuadrados pequeños en cada cuadrado grande es el mismo, es decir, 16 × 25=400 cuadrados pequeños, como se muestra en la Figura VIII-2.
Si la longitud del lado de cada cuadrado grande es 1 mm, el área de cada cuadrado grande es 1 mm2. Después de cubrir con un cubreobjetos, la altura entre el portaobjetos y el cubreobjetos es de 0,1 mm, por lo que el volumen de la sala de recuento es de 0,1 mm3.
Al contar, generalmente se cuenta el número total de bacterias en cinco cuadrados y luego se obtiene el valor promedio de cada cuadrado. Multiplicarlo por 16 o 25 da el número total de bacterias en un cuadrado grande, que luego se convierte al número total de bacterias en 1 ml de solución bacteriana.
