Método de conteo directo para microscopía microbiana
El uso de un hemocitómetro para contar directamente los microorganismos bajo un microscopio es un método de uso común para el recuento microbiano. La ventaja de este método es su intuición y velocidad. Coloque la suspensión bacteriana diluida apropiadamente (o suspensión de esporas) en la cámara de conteo entre el portaobjetos del hemocitómetro y el portaobjetos de cubierta, y cuente bajo un microscopio. Debido al volumen constante de la sala de conteo (0. 1 mm2), el número total de microorganismos por unidad de volumen se puede convertir en función del número de microorganismos observados bajo el microscopio. Debido al hecho de que este método calcula la suma de las células bacterianas vivas y muertas, también se conoce como el método total de recuento bacteriano.
Una placa de conteo de glóbulos sanguíneos suele ser un tobogán de vidrio especialmente diseñado con cuatro surcos que forman tres plataformas. La plataforma media se divide por la mitad por un ritmo horizontal corto, y cada lado de la plataforma está grabado con una cuadrícula. Cada cuadrícula se divide en nueve cuadrados grandes, y el cuadrado grande en el medio es la sala de conteo, donde se lleva a cabo el conteo microbiano.
Generalmente hay dos especificaciones para la escala de la sala de conteo. Una es que un cuadrado grande se divide en 16 cuadrados medios, y cada cuadrado medio se divide en 25 cuadrados pequeños (Figura VIII -2); Otro método es dividir un cuadrado grande en 25 cuadrados medios, y cada cuadrado medio se divide en 16 cuadrados pequeños (Figura VIII -1, c). Pero independientemente del tamaño de la placa de conteo, el número de cuadrados pequeños en cada cuadrado grande es el mismo, es decir, 16 × 25=400 pequeños cuadrados.
Si la longitud lateral de cada cuadrado grande es de 1 mm, el área de cada cuadrado grande es de 1 mm2. Después de cubrir con un vidrio de cubierta, la altura entre el portaobjetos y el vidrio de cubierta es 0. 1 mm, por lo que el volumen de la sala de conteo es 0. 1 mm3.
Al contar, generalmente se cuenta el número total de bacterias en cinco cuadrados, y luego se obtiene el valor promedio de cada cuadrado. Multiplicarlo por 16 o 25 da el número total de bacterias en un cuadrado grande, que luego se convierte en el número total de bacterias en 1 ml de solución bacteriana.
