Comparación entre microscopios confocales y microscopios ópticos comunes
Un microscopio biológico normal consta de tres partes, a saber: ① sistema de iluminación, que incluye fuente de luz y condensador; ② El sistema de aumento óptico, que consta de una lente objetivo y un ocular, es el cuerpo principal de un microscopio. Para eliminar la aberración esférica y la aberración cromática, tanto el ocular como el objetivo están compuestos por grupos de lentes complejos; ③ Dispositivo mecánico utilizado para fijar materiales y facilitar la observación.
La claridad de las imágenes microscópicas no sólo está determinada por el factor de aumento, sino también por la resolución del microscopio. La resolución se refiere a la capacidad del microscopio (o del ojo humano a una distancia de 25 cm del objetivo) para distinguir la distancia más pequeña entre objetos. La magnitud de la resolución depende de la longitud de onda de la luz, el índice de apertura y el índice de refracción del medio. Se puede expresar como:
R=0.61λ /N．A． N．A．＝ｎsin /2
En la fórmula: n=índice de refracción del medio; =ángulo de apertura (el ángulo en el que la muestra abre la apertura de la lente del objetivo), NA.=apertura numérica. ¿El ángulo del espejo es siempre menor que 180? Por tanto, el valor máximo de Sina/2 debe ser inferior a 1.
El índice de refracción del vidrio utilizado para fabricar lentes ópticas es de 1,65 a 1,78, y cuanto más cercano esté el índice de refracción del medio utilizado al vidrio, mejor. Para objetivos secos, el medio es aire y la relación de apertura es generalmente de 0,05 a 0,95; La lente de aceite utiliza aceite de madera de cedro como medio y la relación de apertura puede ser cercana a 1,5.
La longitud de onda de la luz ordinaria es de 400 a 700 nm, por lo que el valor de resolución de un microscopio no será inferior a 0,2 μm. La resolución del ojo humano es de 0,2 mm, por lo que el factor de aumento máximo para el diseño de microscopios suele ser 1000X.
