Microscopía biológica sobre el volumen de bloques de tejido.
Biomicroscopía Hasta la fecha, la fijación en frío, las secciones ultrafinas congeladas y la manipulación en seco congelada son métodos de rutina para microcampos de rayos X de tejidos y células. Los detalles del método se explican en los siguientes puntos:
Microscopios biológicos Los microscopios con lentes de condensador se pueden mover hacia arriba y hacia abajo para lograr un brillo moderado, o se puede cambiar la apertura del expansor de luz variable para lograr un brillo moderado de 9b. Si la luz es soleada, el telescopio se puede elevar adecuadamente y la apertura de la luz variable se puede ampliar adecuadamente. Si la luz es demasiado fuerte, entonces el espejo del foco se puede bajar hacia abajo, la apertura de la luz variable salta para una reducción adecuada. Si en este caso todavía te sientes cegador, puedes elegir el filtro adecuado colocado en el soporte debajo del foco. Esto se puede obtener para que quede satisfecho con el brillo. Por supuesto, en el ajuste de las posiciones superior e inferior de la lente del condensador se puede variar el tamaño de la apertura de la lectura de luz y la selección de los filtros adecuados, eso es después de un cierto período de práctica y experiencia.
Microscopio biológico Una cuestión muy importante es el proceso de muestreo y separación de células, liofilización e inclusión de resina (FD) después de congelar los ultracuadernos, y la liofilización después del análisis fino de cada parte del contenido de la composición elemental de 65 debe ser manipularse con mucho cuidado y no debe dañar las células que se van a observar y analizar. Debido a que el análisis de microáreas de rayos X no consta solo de muchos pasos y el costo es muy alto, si después de un largo tiempo y múltiples pasos de procesamiento, las células analizadas son células dañadas o células muertas, se pueden sacar conclusiones equivocadas. Es muy lamentable. Por ejemplo, los cardiomiocitos aislados mediante el tratamiento con colagenasa tienen dos morfologías, una con forma de bastón largo y otra redonda. Estas últimas son células moribundas que resultaron dañadas durante el aislamiento celular.
Biomicroscopía El contenido y la distribución de electrolitos en estos dos tipos de células son muy diferentes. El Na era muy alto y el K muy bajo en los cardiomiocitos redondos, y la concentración de Ca era muy alta en las mitocondrias. Después de comprobar con otros métodos analíticos, se demostró que el alto nivel de Na y el bajo nivel de K en las células redondas y el alto nivel de Ca en las mitocondrias eran el resultado del daño a la membrana celular durante la separación celular. La fijación en frío de células y tejidos a menudo se realiza mediante fijación por enfriamiento seguida de preservación en nitrógeno líquido. La fijación por enfriamiento es importante para la eficacia de la conservación. Las células vivas o los tejidos frescos son ricos en agua; cuando se apagan, a menudo las células o los tejidos y el agente frío (especialmente con nitrógeno líquido frío puro) entran en contacto directo con las partes de la primera congelación-fijación, formando así una "cáscara", que Impide la fijación por frío del centro de la célula. Como resultado, a menudo se encuentran cristales de hielo en el centro de células más grandes durante el análisis microcelular de rayos X. Para evitar que esto suceda, se utilizan como agentes refrescantes sustancias con un punto de fusión superior al del nitrógeno líquido pero inferior a 806c en seco. Hay muchas sustancias de este tipo, pero * fácil de obtener, económico es el propano concentrado (punto de ebullición 42.120c, punto de fusión 187.10c, peso molecular 44.1), la velocidad de enfriamiento * es rápida. Sin embargo, tiene la desventaja de ser inflamable.
El microscopio biológico se puede colocar en un estante especial para fibras musculares, de modo que la contracción de la fibra muscular para alcanzar una determinada fase de tiempo debe fijarse, encienda inmediatamente la boquilla, de modo que el propano líquido llegue a la fibra muscular, para que la extinción de El frío se arregló. Luego se extrae la fibra muscular junto con la rejilla y se introduce en nitrógeno líquido. Si se fijan células sanguíneas o células aisladas, primero se centrifuga a baja velocidad para concentrar las células, las células se transferirán a una buena conductividad térmica del tubo de plata y el tubo se fijará en frío en la carcasa de propano líquido. El laboratorio Hall fijó el páncreas de rata, las dos primeras piezas de acero con preenfriamiento de helio líquido (o nitrógeno líquido), con una abrazadera sujeta las dos piezas de cobre se colocarán delante y detrás del páncreas, de manera que la tía de la glándula que apaga la fijación en frío. Los tejidos o células se pueden almacenar en nitrógeno líquido durante mucho tiempo después de apagarlos y fijarlos.
