Microscopio biológico sobre el volumen de bloques de tejido.
Microscopía biológica Hasta ahora, la fijación en frío, el corte ultrafino congelado y la liofilización son métodos rutinarios para la microsección por rayos X de tejidos y células. Los siguientes son los detalles de este método:
Microscopios biológicos. Para microscopios con condensador, el condensador se puede mover hacia arriba y hacia abajo para lograr un brillo moderado. Además, la apertura de los diodos emisores de luz variables se puede cambiar para lograr un brillo moderado de 9b. Si la luz es brillante, el condensador se puede elevar adecuadamente y la apertura de la luz variable se puede ampliar adecuadamente. Si la luz es demasiado intensa, se puede bajar el condensador correspondientemente y reducir correspondientemente la apertura del haz de luz transversal. Si aún te sientes deslumbrado en esta situación, puedes elegir un filtro adecuado y colocarlo en el soporte debajo del condensador. De esta forma podrás conseguir el brillo que te satisfaga. Por supuesto, se necesita un cierto período de práctica para adquirir experiencia en el ajuste de la posición arriba y abajo del condensador para lograr un tamaño de apertura variable y seleccionar los filtros apropiados.
Una cuestión muy importante en microscopía biológica es que durante el proceso de recolección y separación de células, después de la liofilización y la inclusión de resina (FD), después de congelar gránulos ultrafinos y después de la liofilización, el contenido de 65 elementos de cada parte debe analizarse con mucho cuidado y en absoluto dañar las células a analizar. Porque el análisis de microáreas con rayos X no sólo implica muchos pasos, sino que también cuesta mucho. Si después de mucho tiempo y de múltiples pasos, las células analizadas son células dañadas o células muertas, sería una lástima sacar conclusiones erróneas. Por ejemplo, los cardiomiocitos aislados después del tratamiento con colagenasa tienen dos formas, una tiene forma de varilla larga y la otra es redonda. Estas últimas son células moribundas que se dañan durante el aislamiento celular.
Microscopía biológica El contenido y la distribución de electrolitos en estos dos tipos de células son muy diferentes. El Na es muy alto y el K es muy bajo en los cardiomiocitos redondos, y la concentración de Ca en las ramas lineales es muy alta. Después de comprobar con otros métodos de análisis, se demostró que el alto nivel de Na y el bajo nivel de K en las células redondas y el alto nivel de Ca en las mitocondrias se debían al daño de la membrana celular durante el proceso de separación celular. El método de fijación en frío de células y tejidos suele consistir en apagarlos y fijarlos primero y luego almacenarlos en nitrógeno líquido. El enfriamiento y la fijación son muy importantes para el efecto de conservación. Las células vivas o los tejidos frescos son ricos en agua. Al enfriar, las partes de las células o tejidos que están en contacto directo con el criógeno (especialmente cuando se apagan con nitrógeno líquido) primero se congelan y fijan, formando así una "cáscara", que impide que la parte central de las células sea triturada. y reparado en frío. Por lo tanto, al realizar un análisis de microáreas en línea X, a menudo se encuentra que hay cristales de hielo en el centro de células más grandes. Para evitar que esto suceda, se utiliza como refrigerante triturado una sustancia con un punto de fusión más alto que el nitrógeno líquido pero una sequedad menor de -806c. Existen muchas sustancias de este tipo, pero la más fácil y barata es el propano concentrado (punto de ebullición - 42.120c, punto de fusión - 187.10c, peso molecular 44,1), y la velocidad de enfriamiento también es la más rápida. Pero su desventaja es que es inflamable.
El microscopio biológico puede colocar la fibra muscular en un marco especial. Cuando la contracción de la fibra muscular alcanza una determinada fase y es necesario repararla, la boquilla se enciende inmediatamente para rociar propano líquido a la fibra muscular para apagarla y repararla. Luego se extrajeron las fibras musculares junto con la estructura y se colocaron en nitrógeno líquido. Si se fijan células sanguíneas o células separadas, primero centrifugue a baja velocidad para concentrar las células, transfiera las células a un pequeño tubo plateado con buena conductividad térmica, coloque el tubo en propano líquido y congélelo para fijarlo. Al reparar el páncreas de rata en el laboratorio Hall, primero enfríe previamente los dos bloques de acero con helio líquido (o nitrógeno líquido), sujete los dos bloques de cobre con pinzas y colóquelos antes y después del páncreas para apagar y fijar la glándula uterina. . Los tejidos o células pueden apagarse y fijarse y luego transferirse a nitrógeno líquido para su almacenamiento a largo plazo.
